人骨髓间充质干细胞与髓核细胞共培养后的类髓核分化效应及其对髓核细胞表型的调节作用.docx

人骨髓间充质干细胞与髓核细胞共培养后的类髓核分化效应及其对髓核细胞表型的调节作用[摘要]目的探讨人骨髓间充质干细胞分别与正常及退变髓核细胞共培养后的类髓核分化效应及其对髓核细胞表型的调节作用并进行比较。方法取来源于腰椎退变患者以及脊柱侧弯患者的间盘组织通过改良Pfirrmann法对其退变程度进行分级进行髓核细胞（NPCs）的分离培养及鉴定通过术中椎弓根钉道取血进行骨髓间充质干细胞（BMSCs）的分离培养及鉴定。取传至第3代细胞进行共培养。建立5个培养组：BMSCs单独培养组退变NPCs单独培养组正常NPCs单独培养组BMSCs与退变NPCs共培养组BMSCs与正常NPCs共培养组。共培养7d后RT-PCR法检测各组细胞SOX-9、聚集蛋白聚糖Aggrecan与Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达。结果相较于BMSCs单独培养组共培养组BMSCs的SOX-9、Aggrecan与Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达均有明显增加（P＜0.05）。同时与BMSCs与正常NPCs共培养组相比BMSCs与退变NPCs共培养组BMSCs的SOX-9、Aggrecan与Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达均有明显增加（P＜0.05）。与退变NPCs单独培养组相比共培养组退变NPCs的SOX-9、Aggrecan与Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达均明显增加（P＜0.01）。与正常NPCs单独培养组相比共培养组正常NPCs的SOX-9、Aggrecan与Ⅱ型胶原蛋白的mRNA表达均明显增加（P＜0.01）。结论BMSCs与NPCs共培养时的相互作用能促使BMSCs向类髓核表型分化较之正常NPCs退变NPCs与BMSCs共培养时能更明显地促进BMSCs向类髓核表型分化。同时BMSCs对NPCs的调节作用能促进其特征性相关基因表达与退变NPCs共培养时这一效应依然明显。[关键词]骨髓间充质干细胞；髓核细胞；共培养[中图分类号]R681.5；R329[文献标识码]A[文章编号]1673-9701（2012）06-0006-04Co-cultureinduceshumanbonemarrow-derivedmesenchymalstemcelldifferentiationandmodulationofthenucleuspulposuscellphenotypeZHAOChencheng1MAXun2ZHANGMing1MANXiaoxu1GUANXiaoming11.DepartmentofOrthopaedicstheSecondHospitalofShanxiMedicalUniversityTaiyuan030001China;2.DepartmentofOrthopaedicsShanxiAcademyofMedicalSciences&ShanxiGreatHospitalTaiyuan030001China[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheinteractionbetweenhumanbonemarrow-derivedmesenchymalstemcells(BMSCs)andnucleuspulposuscells(NPCs)frombothnondegenerateanddegeneratediscsduringinvitroco-cultureandmakeacomparison.MethodsTheisolationandidentificationofBMSCsandNPCswereperformedonbonemarrowbloodandnucleuspulposusfromeitherdiskdegenerationpatientsorscoliosispatients.Fivegroupsweredesignedasfollows:Agroup(BMSCsgroup)Bgroup(degeneratedNPCsgroup)Cgroup(nondegeneratedNPCsgroup)Dgroup(BMSCswithdegeneratedNPCsco-culturedgroup)andEgroup(BMSCswithnondegeneratedNPCsco-culturedgroup).The