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蒜头果内生真菌次生代谢产物抑制人类致病菌活性的研究 摘要: 真菌在蒜头果中的存在已经被广泛研究,但对于在蒜头果内生真菌的次生代谢产物研究却相对较少。本文通过分离并鉴定蒜头果内生真菌,并运用多种方法对其次生代谢产物进行分离纯化和活性检测,结果表明其中一种次生代谢产物对人类致病菌具有较强的抑制作用,具有潜在的利用价值。 关键词: 蒜头果;内生真菌;次生代谢产物;抑菌活性 一、前言 蒜头果是一种常用的调料和药材,具有卓越的生物活性和健康保健功能。蒜头果内生真菌可以分解蒜头果中的有机物质,造成储藏和使用过程中的质量损失。此外,一些内生真菌还会产生毒素,造成食品安全风险。因此,对于蒜头果内生真菌的分离和鉴定以及次生代谢产物的研究具有重要意义。 二、材料和方法 2.1样品采集和处理 采集新鲜的蒜头果,并用70%酒精消毒。取适量的蒜头果样品,切成小块或磨粉备用。 2.2内生真菌的分离和鉴定 将蒜头果样品接种到高压蒸汽灭菌的琼脂板上,并进行培养。根据菌落形态和形态特征,鉴定内生真菌的种类。采用PCR技术对内生真菌进行扩增,并进行测序鉴定。 2.3次生代谢产物的提取和分离纯化 将含有内生真菌的蒜头果样品加入到适量的乙醇中,进行超声浸提。对提取液中的次生代谢产物进行液-液分配和硅胶柱层析分离纯化。 2.4抑菌活性测试 选用人类不同致病菌作为实验对象,运用纸片扩散法和渐进稀释法对次生代谢产物的抑菌作用进行测定。 三、结果和讨论 3.1内生真菌的种类 通过鉴定,获得了5株内生真菌。其中,Aspergillusniger和Penicilliumfuniculosum是最常见的品种。 3.2次生代谢产物的分离纯化 采用液-液分配和硅胶柱层析分离纯化提取液中的次生代谢产物。通过质谱分析,找到了具有明显峰值的蒜头果内生真菌次生代谢产物。 3.3抑菌活性测试 实验结果表明,其中一种次生代谢产物对人类致病菌具有较强的抑制作用,抑菌活性较高。而另一种次生代谢产物则没有发现抑制活性。 四、结论 通过本次实验,成功分离纯化了蒜头果内生真菌生产的次生代谢产物,并发现其中一种具有较强的抑制人类致病菌的活性。这一发现具有重要意义,可以为开发仿生抗菌剂提供一定的参考和借鉴。同时,这也提醒人们在蒜头果的储藏、加工和使用过程中注意内生真菌的存在以及对人体健康的潜在危害。