结核分枝杆菌的核酸检测ppt课件.ppt

结核分枝杆菌核酸及血清学检测结核分枝杆菌核酸检测常用技术抗酸染色2014年WHO关于结核诊断的标准GeneXpert痰标本与处理液
1：2混合INH单耐药的患者通常不会考虑立即改变治疗方案，与此相反，对RIF单耐药的患者，无论INH是否耐药，都会采取与耐多药患者相同的治疗方案1。
约90%利福平耐药的结核患者同时异烟肼耐药，也就是耐多药结核患者2。

SvenO.Friedrichetal,.SuitabilityofXpertMTB/RIFandGenotypeMTBDRplusforPatientSelectionforaTuberculosisClinicalTrial.JournalofClinicalMicrobiology.2011(49):2827-2831.
XichaoOuetal.AfeasibilitystudyofXpertMTB/RIFtestattheperipherallevellaboratoryinChina.InternationalJournalofInfectiousDiseases.2015(31):41-46.传统实时荧光定量PCR检测样本类型（一）样本类型（二）标本留取标准2．支气管抽吸物、支气管肺泡灌洗标本、肺穿刺物、肺活检标本
（1）对于不能留取痰标本的患者：推荐使用侵入性采集技术获取标本，比如纤维支气管镜检查、细针肺穿刺、肺活组织检查。
（2）严格器械清洁和消毒，避免引起交叉污染和感染。
（3）支气管镜不能接触自来水，通免污染环境分枝杆菌。
（4）对难以诊断的病例推荐使用其他侵入性技术采集标本，比如细针穿刺、开放肺活组织检查，无菌条件下采集的经支气管活检和其他活检标本，运输过程中，应加入0.5～1ml无菌的生理盐水。
（5）支气管分泌物至少2～5ml；支气管肺泡灌洗液至少20-50ml。3.胃灌洗液
（1）婴幼儿、儿童和迟钝者诊断肺结核时，鉴于无法采集标本或支气管灌洗液，推荐采集胃液标本，通过胃灌洗咽下去的痰液。
（2）标本应在采集4小时内送到实验室，否则应置于一次性内含100ml碳酸钠酸他的无菌容器中。
（3)胃灌洗液需连续采集3天，体积5～10ml，调节pH至中性。
4.尿液
（1）采集标本前，应清洗外生殖器，推荐连续采集3天清晨中段尿于无菌容器中，用于培养的尿液标本至少需要40ml
（2）只有在不能获得中段尿时，可以使用导尿术采集标本。
（3）标本运送不及时，应冷藏保存。5.无菌采集的体液（脑脊液、胸水、腹水、心包积液、关节液、骨髓）
（1）临床医生采用抽吸技术或外科操作无菌收集体液标本于无菌容器。
结核杆菌DNA及Xpert标本：为防止标本凝固，需加入EDTA抗凝处理（可注入于长紫管中颠倒混匀抗凝处理）。
IFN-γ释放试验（T-SPOT.TB）标本：分离淋巴细胞需加入肝素抗凝，抗凝比例为100ml胸腹水加入0.8ml肝素，颠倒混匀。
（2）标本尽可能快的运送到实验室
（3）应提交足够量的样本，脑脊液＞5ml，胸水和腹水5～10ml。9、病理组织切片（核酸检测）
在一只干净的离心管中加入6-12片5-10μm厚的FFPE，
勿切白片。
病理组织切片已固定，结核分枝杆菌已无活性，无法做培养。DNA扩增技术检测有哪些不足免疫斑点干扰素释放试验