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UF-100尿沉渣分析仪的原理与干化学法结果的分析及注意事项二、UF-100原理:应用荧光染色剂将尿沉渣中不同物质的细胞核或细胞膜进行分别染色后,利用最先进的流式细胞仪原理和技术,根据荧光、激光散射强度、散射波幅度及细胞大小的不同和细胞通过时产生的电阻抗分别落在不同的区域,来识别和计数尿内细胞定量数据,并打印出RBC和WBC的直方图。染色性 9-氮杂菲(Phenanthridine) 染色DNA和RNA 发射荧光为:橙色对死细胞胞膜穿透性强 羰花青(Carbocyanine) 细胞膜、核膜以及线粒体等膜性物质被染色 发射荧光为:绿色尿沉渣全自动分析(UF-100尿沉渣分析仪介绍) 一、特点: 简化操作流程,提高分析效率,降低劳动强度。结果准确,重复性好,提供定量数据,进行有效筛选,可检测各种有形成份信息,有效协助血尿来源的鉴别诊断。UF-100为临床检验的常规分析,为体检和疾病的筛选提供了较为全面﹑快速﹑准确而灵活方便的分析手段,检测重复性好,结果可靠,减少人为的误差,报告以每微升含有多少个细胞,通过观察尿中细胞数量可以帮助了解相关疾病(如肾炎﹑膀胱炎﹑肾结石﹑肾结核)等的诊断和鉴别诊断,通过观察这种病人尿中红细胞数量的变化,可了解病人的疗效观察。由于红细胞在尿液中直径大约8um,没有细胞核及线粒体,所以荧光强度很弱,红细胞在尿液标本中大小不均,部分溶解成小红细胞碎片,或者在肾脏疾病时排除的红细胞也大小不等,因此红细胞前向散射光强度差异较大。一般来看,荧光几乎极低和散射光大小不等都可为红细胞。 该仪器除给出尿红细胞数量(每微升的细胞数和每高倍视野的平均细胞数)参数外,还可报告尿中细胞其他参数。如均一性红细胞(IsomorphicRBC)的百分比,非均一性红细胞(Dysmorphic)的百分比,非溶血性红细胞的数(Non–IysedRBC#)和百分比(Non–IysedRBC%)。如尿内红细胞多时,化验单上提示: 新版本 RBC—InfoMicyocytic小红细胞 Normocytic正常红细胞 Non—Classified不典型红细胞 1红细胞及其相关参数的临床意义 ①红细胞数量变化的临床意义:显微镜计数法,正常成人尿中红细胞约为<100万/24小时;UF-100仪器法参考值为男性0~12/ul,女性0~24/ul;离心后为0~偶见/HPF,如每高倍视野均可见1~2个为增多,≥3个/HPF为镜下血尿。通过动态观察病人尿红细胞数量变化,可了解病人治疗的效果。②利用红细胞形态来鉴别血尿来源:1979年Birch和Fairley首先用相差显微镜观察红细胞形态变化,把血尿分为肾小球源性血尿(简称肾性)和非肾小球源性(简称非肾性)血尿两大类,这种分类方法以后得到了许多学者的赞同。这种分类方法主要是根据红细胞形态的变化,将均一性的红细胞(红细胞形态基本与正常红细胞相似)归为非肾性血尿,非均一性的红细胞(红细胞形态大小不等)归为肾性血尿。但在显微镜检查法是通过人眼观察单个红细胞的形态,需要熟练的技术并受主观因素的影响。Shichiri和丛玉隆等报道用尿液分析仪测量尿红细胞体积来鉴别血尿来源,认为较显微镜法准确,但此法容易将与红细胞体积相等或较小的成份(如细菌和结晶)误认为红细胞。特别是霉菌,因为尿液放置时间较长时,细菌生长快,霉菌个体与小红细胞相似,所以在UF-100尿沉渣仪器中误认是红细胞,计数就多,这方面的文章最近有报导。 干化学法检测尿中红细胞: 主要是红细胞或红细胞破碎后HB,HB中的亚铁血红素有类似过氧化物酶活性,催化分解过氧化物释放新生态氧使邻甲苯胺氧化显色,此法可测定完整红细胞,破碎红细胞中的游离血红蛋白及肌红蛋白三部分。其颜色深浅与血红蛋白含量有关。试带法对血红蛋白检测灵敏度约为0.015~0.03mg/dl,对红细胞检测灵敏度约为5~15个/ul。新鲜未离心尿,计数板法红细胞为10×106/L时,试带法的分析灵敏度为70~80%。与计数板法相比,若尿中红细胞溶解,则试带法红细胞分析特异度降低。白细胞: 观察尿液内白细胞数量可帮助有关疾病(如泌尿系感染.膀胱炎.结核等)的诊断与鉴别诊断,通过动态观察这些病人尿内白细胞数量变化,来确定病人的疗效观察和愈后。 白细胞在尿液内分布直径大约10um,稍比红细胞大,前向散射光强度比红细胞稍大一些,但白细胞含有细胞核而红细胞无细胞核,因此它有高强度的前向荧光,就能将白细胞与红细胞区别开来,白细胞出现在散射图的正中央。 白细胞也像红细胞那样有很多形状,当白细胞存活时,白细胞会呈现前向散射光强和前向荧光弱;当白细胞受损害或死亡时,会呈现前向散射光弱和前向荧光强。 利用白细胞激光散射强度和荧光强度的技术识别白细胞高活性和低活性的不同程度,来进一步对急性感染和慢性感染,以及恢复期作出判断。