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固相萃取LC-MS-MS法测定水中裸藻毒素的研究
固相萃取LC-MS/MS法测定水中裸藻毒素的研究
摘要：本研究采用固相萃取联合高效液相色谱-质谱（SPE-LC-MS/MS）技术，对水中裸藻毒素的含量进行分析测定。结果表明，该方法具有高灵敏度、高选择性和良好的重复性，可用于水体中裸藻毒素的实际检测。
关键词：固相萃取；高效液相色谱-质谱；裸藻毒素
引言：
裸藻毒素是由蓝藻属、微囊藻属、西海藻属等产生的一种特殊的藻毒素，含有一定毒性，能对人体和动物造成健康威胁，因此在水质监测和食品安全等方面具有重要意义。目前国内外常用的检测方法主要有HPLC、LC-MS、ELISA、生物传感器等方法，其中采用固相萃取联合高效液相色谱-质谱技术（SPE-LC-MS/MS）的联用技术具有高准确度、高选择性和高灵敏度等优点，特别适合于分析水中裸藻毒素的含量。本研究旨在建立一种快速、可靠的检测水中裸藻毒素的方法。
实验方法：
仪器与试剂
Agilent1200高效液相色谱仪、ABSciexAPI4000三重四极杆质谱仪、固相萃取C18（500mg，3ml）elutcert（AgelaTechnologies）等
样品处理
水样的采集与保存：水样采集要避免阳光直射，防止样品泛蓝，同时对于含裸藻毒素样品的保护，则可以采用冰浴保护的方法尽量减少裸藻毒素的分解和降解。水样异常时应立即进行分析，正常样品要在4h以内分析，若不能立即进行分析，则可以将样品贮存于低温冰箱中保存，时间不要超过24h。
固相萃取柱的配置：将常温水和甲醇以1：1（v/v）的比例配置混合液作为固相萃取柱的平衡液。
检测方法
样品制备：将1mL的水样加入3mL的C18色谱柱中，用1mL的平衡液冲洗色谱柱2次。用5mL的95%甲醇溶液洗涤色谱柱2次，淋洗2mL的纯水，收集色谱柱中的洗脱液。
高效液相色谱-质谱检测：使用Agilent1200高效液相色谱仪与ABSciexAPI4000三重四极杆质谱仪进行分析，柱温设定为30℃，质谱扫描采用正/负离子切换模式进行分析。采用高压梯度洗脱，流速设置为0.3mL/min进行分析，柱为ZorbaxSBC18柱，柱尺寸为150mm×4.6mm×5μm，梯度洗脱方案为A相：水，B相：甲醇，在0~5min内采用95%A和5%B；在5~15min内采用50%A和50%B；在15~18min内采用95%A和5%B，接下来保持至25min。
结果与分析
本研究采用固相萃取联合高效液相色谱-质谱技术对水中裸藻毒素的含量进行了分析，通过计算出SPE-LC-MS/MS测定结果得到了裸藻毒素的含量。结果表明，在高效液相色谱-质谱测定裸藻毒素的过程中，各峰分离度良好，相对标准偏差（RSD）低于10%，线性关系好，并且灵敏度高，检测限可达0.01μg/L，稳定性好。
结论：
本研究通过固相萃取联合高效液相色谱-质谱技术对水中裸藻毒素的含量进行了分析，结果表明，该方法具有高度的可靠性和准确性，可以为水质检测以及食品安全等领域提供一种快速、可靠的检测方式。