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药学微生物基础教案教学目标:1、知道体外抗菌试验的应用。2、熟记最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)概念。3、熟知常用的体外抗菌试验的方法和影响因素。第七章药物体外抗菌试验最低抑菌浓度(MIC)是指药物能抑制微生物生长的最低浓度,通常用µg/ml或U/ml来表示;稀释法主要有液体培养基稀释法和固体培养基稀释法。 1.液体培养基稀释法 在一系列试管中,用液体培养基将药物稀释,使各管内含有的药物呈一系列递减的浓度,然后在每支试管内加入一定量的试验菌。在35℃下培养24-48小时后,肉眼观察各试管的浑浊情况,记录能抑制细菌生长的最低浓度即为MIC。进一步将未长菌试管内的培养液移种到新鲜的琼脂培养基上,如重新长出细菌说明该浓度只有抑菌作用,如无菌生长则认为该浓度具有杀菌作用,记录为MBC(图7-1)72.挖沟法 常用于测试一种药物对几种细菌的抗菌作用。这种方法是先制备普通琼脂平板,然后在平板上挖直沟,在沟内滴加药液。在沟两侧接种细菌(图7-2)。经培养后观察细菌生长情况,由沟和细菌间的抑菌距离来判断该药物对这些细菌的抗菌能力。11先制备含菌平板,然后在平板上打若干个洞,在洞内加入药液。培养后观察各洞周围细菌的生长情况,根据各洞抑菌圈的大小来判断各种药物对该菌的抗菌能力(图7-3)。此法适用于多种药物对一种细菌的抗菌能力的测定。13检查两种抗菌药物在联合应用时的相互作用,两种药物产生的作用之间既可能产生相互影响,也可能彼此间没有影响(无关)。产生影响时,既可能是相互加强(协同作用),也可能是相互减弱(拮抗作用)。在已经接种过细菌的平板上,垂直放置两条浸有不同药液的滤纸条,经培养后根据两种药液形成抑菌区的图形来判断这两种药物对该细菌的作用是无关、拮抗还是协同(图7-4)。15联合抗菌试验法(纸条试验)结果171.菌种在抗菌试验中所用的菌种,必须是国家卫生部生物制品检定所菌种保藏中心提供的标准菌株。在某些特定情况下需要应用临床分离的菌株时,则必须用经过严格鉴定、纯化及合理保藏的菌株。3.抗菌药物药物的物理状态、浓度、稀释方法等可直接影响抗菌试验的效果,要求精确配制。固体药物必须制成溶液,难溶于水的药物要用有机溶剂或酸碱溶解后再使用。药物溶液的pH值应尽量接近中性,以确保药物的稳定性和不影响细菌的生长。小结:1、何谓MIC和MBC?2、药物体外抗菌试验的方法常用的有什么方法?3、影响药物体外抗菌试验的因素有哪几种?一、填空题(将正确答案填入空内) 1、药物的体外抗菌试验具有_____、_____、_____等方面的用途,运用抗菌试验还可以区别药物是属于杀菌剂还是抑制,它们之间的区别是在于____________________________。体外抗菌试验常有____________方法。 2、联合药敏试验的目的是为了________________________的特殊要求而进行的,通常可有______、______、______、______四种结果。二、是非题:如错误,请在错处用笔划出,并改正。 1、抑菌剂是指去除了该药物后,细菌的生长繁殖不能恢复() 2、MIC是指最大抑菌浓度() 三、名词解释1、MIC2、MBC 四、简答题 1、药物体外抗菌试验常用的方法有哪几种? 2、影响药物体外抗菌试验的因素有哪几种? 3、抗生素效价单位有哪几种表示方法?