第三节免疫检测技术的基本原理ppt课件.ppt

第三节免疫检测技术的基本原理免疫学检测技术的优点免疫分析技术的应用凝集试验试管法半定量试验2.间接凝集法3.间接凝集抑制试验凝集反应2.沉淀反应单向琼脂扩散试验双向琼脂扩散试验对流免疫电泳测吸光度计算抗原或抗体的含量3.中和反应如抗“O”试验免疫标记技术酶联免疫吸附试验酶及其底物

酶结合物是酶与抗体或抗原,半抗原在交联剂作用下联结的产物。是ELISA成败的关键试剂，它不仅具有抗体抗原特异的免疫反应，还具有酶促反应，显示出生物放大作用，但不同的酶选用不同的底物，将得到不同的颜色反应.酶戊二醛交联法(一步法）戊二醛交联法（二步法）过碘酸盐氧化法标记免疫物的分离与鉴定ELISA的种类和变化（一）双抗体夹心法获得待分析物的未标定抗体间接法是检测抗体最常用的方法，其原理为利用酶标记的抗抗体以检测已与固相结合的受检抗体，故称为间接法。酶联免疫吸附试验(ELISA-间接法)包被固相载体:
用已知抗原包被
固相载体（三）竞争法用已知特异性
抗体包被
固相载体对照管由于只加酶标抗原，与固相抗体充分结合，故分解底物显色深；测定管的显色程度则随待测抗原和酶标抗原与固相抗体竞争结合的结果而异。如待测抗原量多，竞争性地抑制酶标抗原与固相抗体结合，使固相上结合的酶标抗原量减少。因此，加入底物后显色反应较弱。饲料中盐酸克伦特罗的测定
饲料中毒素的测定（主要包括黄曲霉毒素，简曲霉毒素）
饲料中有害微生物的快速筛检（如沙门氏菌）河豚毒素食源性病原菌检测试剂盒转基因成份的检测：如转基因玉米中中的cry9e蛋白转基因大豆中的CP4EPSPS蛋白质．

肉制品的掺假检测：
以辣根过氧化物酶标记不同动物肌肉和血清球蛋A抗血清检查牛肉、马肉、猪肉、羊肉和驼肉检测14种畜禽熟肉制品，包括牛肉、羊肉、鹿肉和马肉等，在掺假率为1%时即可检出

荧光抗体技术的原理与方法免疫荧光技术免疫荧光技术——直接法免疫荧光技术——间接法免疫荧光技术荧光显微镜免疫金标记技术一、胶体金制备胶体金的制备及特性胶体金结合物（Conjugate）一、免疫渗滤测定(IFA)斑点渗漏法IFA——结果判断二、免疫层析测定（ICA）层析法兔抗鼠IgG斑点金免疫层析试验（二）ICA---竞争法测抗原ICA——间接法测抗体IFA与ICA的比较1、罗立新,缪珑,潘力,等.快速检测产单核李斯特菌免疫胶体金层析法的研究[J].中国卫生检验杂志,2006,16(2):154-156.
2、赖卫华,熊勇华,陈高明,等.应用胶体金试纸条快速检测赭曲霉毒素A的研究[J].食品科学,2005,26(5):204-207.5、王中民,李君文,王新为,等.免疫金渗滤试验检测食品中沙门氏菌的研究[J].微生物学免疫学进展,2001,29(4):45-47.
6、刘永德,汪毅,陈禹雷,免疫金探针快速检测禽流感病毒研究[J].上海交通大学学报:农业科学版,2005,23(3):321-324.斑点金免疫渗滤试验免疫印迹法图解第四节放射性核素标记技术常用标记方法直接法（氯胺T法）间接法（连接法）间接法（连接法）标记免疫物的分离与鉴定结合相β液闪仪γ计数器化学发光标记免疫技术标记免疫分析三方式与四环节免疫测定分类小结作业感谢亲观看此幻灯片，此课件部分内容来源于网络，
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