赤芍中赤芍总苷的提取与纯化.pdf

赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--赤芍中赤芍总苷的提取与纯化一、项目概述：赤芍为毛莨科植物芍药(PaeonialactifloraPall．)或川赤芍(PaeoniaveitchiiLynch)的干燥根赤芍总苷(totalpaeonyglycosideTPG)是其主要活性成分主要包括芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等单萜类化合物其中芍药苷、芍药内酯苷含量较高。现代药理研究表明赤芍总苷具有广泛的药理作用主要表现在抑制血小板聚集、抗凝血、抗血栓、抗动脉粥样硬化等作用。本实验采用高效液相色谱(highperformanceliquidchromatographyHPLC)法对工艺过程中芍药苷、芍药内酯苷的含量同时进行测定对赤芍的提取纯化工艺进行考察进而为进一步控制赤芍总苷的质量提供实验依据。二、实验目的：1.掌握赤芍总苷的提取分离工艺；2.掌握高效液相色谱仪的使用原理及操作方法；3.掌握大孔吸附树脂分离的原理及操作方法。三、实验器材(一)仪器高效液相色谱仪玻璃柱旋转蒸发仪真空干燥器、电子分析天平高效液相色谱仪旋转蒸发仪超声仪1000ml圆底烧瓶冷凝管烧杯、铁架台橡胶软管、HPLC、容量瓶(二)试剂)大孔吸附树脂D10lAB-8；分析纯；95％乙醇、70％乙醇、30％乙醇、芍药苷对照品、三氯甲烷、乙酸乙酯、甲醇、甲酸、5％香草醛硫酸溶液、L磷酸二氢钾溶液、硅胶G；赤芍药材粉末（川芍）柱层析硅胶正丁醇2%乙酸铅盐酸淀粉碘滴定液蒸馏水四、实验内容：赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--赤芍中赤芍总苷的提取与纯化--（一）赤芍药材的质量检查根据《中华人民共和国药典》2015年版一部赤芍项下的项目对赤芍药材进行质量检查。1.性状本品呈圆柱形稍弯曲长5—40cm直径—3cm。表面棕褐色粗糙有纵沟和皱纹并有须根痕和横长的皮孔样突起有的外皮易脱落。质硬而脆易折断断面粉白色或粉红色皮部窄木部放射线纹理明显有的有裂隙气微香味微苦酸涩。2.鉴别1）本品横切面：木栓层为数列棕色细胞。栓内层薄壁细胞切向延长。韧皮部较窄形成层成环木质部射线较宽导管群作放射状排列导管旁有木纤维。薄壁细胞含草酸钙簇晶并含淀粉粒。2）取本品粉末加乙醇10ml振摇5分钟滤过滤液蒸干残渣加乙醇2ml使溶解作为供试品溶液。另取芍药苷对照品加乙醇制成每1ml含2mg的溶液作为对照品溶液。照薄层色谱法（通则0502）试验吸取上述两种溶液各4l分别点于同一硅胶G薄层板上以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸（40：5：10：）为展开剂展开取出晾干喷以5％香草醛硫酸溶液加热至斑点显色清晰。供试品色谱中在与对照品色谱相应的位置上显相同的蓝紫色斑点。3.检查1）水分：按《中国药典》2015年版项下操作取本品粉末约1g平铺于恒重的扁形称量