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黄瓜离体再生与遗传转化体系的研究 黄瓜(Cucumissativus)是一种重要的蔬菜作物,具有较高的营养价值和药用价值。然而,黄瓜的遗传改良一直是制约其产量和品质提高的瓶颈。因此,开发高效的黄瓜离体再生和遗传转化体系具有重要意义。本文主要介绍黄瓜离体再生和遗传转化体系的研究现状和进展。 一、黄瓜离体再生研究 黄瓜离体再生是利用离体组织培养技术让植物再生一个或多个完整植株的过程。黄瓜离体再生的研究自20世纪初期起就开始了,但因黄瓜对植物激素对抗反应强烈、微量元素成分复杂等原因而一直面临技术难题。近年来,研究人员通过细胞培养、愈伤组织诱导和愈伤组织再生等方法成功地实现了黄瓜的离体再生。 1.细胞培养 在黄瓜叶片、幼嫩茎尖和花蕾等组织中,细胞的再生能力较强。通过细胞分裂和细胞分化,可以获得许多分生组织。研究显示,在配合合适培养基和体外合成激素处理后,黄瓜细胞可以分化成愈伤组织,然后发生领先器官的分化和营养器官的分化,获得完整的植株。 2.愈伤组织诱导 黄瓜茎尖、子叶、胚轴、叶片或花柄、花萼、花皮均可获得稳定诱导的愈伤组织。在适宜的培养基和体外合成激素处理下,愈伤组织可以快速生长和增殖,最终再生成完整的植株。研究表明,依靠愈伤组织诱导技术,成功地获得了高质量和高频率的黄瓜愈伤组织和植株。 3.愈伤组织再生 在黄瓜愈伤组织培养体系中,配合合适培养基和体外合成激素处理,可以促进愈伤组织进一步分化成领先器官和营养器官,最终再生成完整的植株。 二、黄瓜遗传转化研究 黄瓜遗传转化是指通过外源基因导入,改善黄瓜的生物学特性和经济属性。纵向比较遗传转化种质资源的研究结果表明,遗传转化种质资源解决了黄瓜的许多瓶颈问题,因此对黄瓜遗传的改良有着重要的意义。 1.农杆菌介导法 农杆菌介导法是目前黄瓜遗传转化中最为常用的方法。在适宜的农杆菌菌株、自然缺陷或构建人工缺陷的植物表达载体、诱导培养条件下,通过农杆菌注射黄瓜愈伤组织,将目的基因导入植物。研究表明,通过农杆菌介导法可以将Bar、Hpt、NPTII等基因转移到黄瓜中,实现了抗虫、抗病、耐盐、耐旱等性状的引入。 2.基因炮法 基因炮法又称基因小炮法,是近年来发展的黄瓜遗传转化方法。将目的基因载体粒子,用高速冲击技术注入黄瓜花粉、筛孔、愈伤组织等可培养细胞中,完成目的基因的靶向导入。研究表明,基因炮法可以成功将Bt基因、vp28水蜡基因等导入到黄瓜细胞中。 三、总结和展望 综合上述,黄瓜离体再生和遗传转化体系的研究为优化黄瓜的品质、抗病性、耐逆性等多种性状提供了新思路和新方法。然而,当前黄瓜离体再生和遗传转化研究仍处于初级阶段,需要加大投入,深化研究,完善技术。未来,我们可以通过遗传转化技术导入表达具有高抗病、抗虫、耐逆、抗逆、产品育性和高产能等性状的基因,优化黄瓜的生物学和经济性状,开发适应市场的高性能品种。