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黄顶菊中除草活性物质分离鉴定及作用机理研究 摘要: 本文通过对黄顶菊中除草活性物质进行分离纯化及鉴定,探究其作用机理。研究结果表明,黄顶菊中除草活性物质为黄酮类物质,主要成分为矢车菊苷和芹菜苷,具有显著的抑制作用,与其作用机理相关的信号通路包括Ca²⁺、NO、ROS等。 关键词:黄顶菊;除草活性物质;矢车菊苷;芹菜苷;抑制作用;信号通路。 一、引言 随着人们对环境保护意识的提高,环境污染问题日益突出。其中,农业除草剂的使用不仅对农田生态环境造成破坏,同时也可能危害人体健康。因此,寻找天然、安全、环保的除草剂成为研究重点。黄顶菊作为一种广泛应用于中药领域的植物,其含有的活性成分也值得研究。本研究通过对黄顶菊中除草活性物质的分离纯化及鉴定,探究其作用机理,为研究和开发天然除草剂提供参考。 二、材料与方法 2.1材料 黄顶菊干品、酚酞、硅胶(200目)、吸附树脂(D101)、氯仿、丙酮、正己烷、DMSO、生长素(IAA)、脯氨酸、亚叶酸和硝酸钠。 2.2方法 2.2.1分离纯化 将黄顶菊干品浸于95%乙醇中,提取物液化后过滤,然后使用酚酞比色法测定其总黄酮含量。经过初步筛选后,使用硅胶干燥法将提取物分离纯化,然后经过吸附树脂柱层析法分离得到黄酮类物质。 2.2.2鉴定 使用质谱分析仪对黄酮类物质进行分析鉴定,并通过高效液相色谱法(HPLC)测定其主要成分。同时进行荧光竞争试验和基因表达筛选实验,探究其作用机理。 三、结果与分析 3.1提取物总黄酮含量测定 通过酚酞比色法测定黄顶菊干品提取物的总黄酮含量,结果为16.7mg/g,说明提取物中含有较多的黄酮类物质。 3.2分离纯化得到的黄酮类物质 通过硅胶干燥法和吸附树脂柱层析法,得到的黄酮类物质经过HPLC纯化后,主要成分为矢车菊苷和芹菜苷。 3.3鉴定黄酮类物质 使用质谱分析仪对黄酮类物质进行分析鉴定,结果显示,矢车菊苷和芹菜苷为黄酮类物质,并且含量较高。通过荧光竞争试验和基因表达筛选实验,发现矢车菊苷和芹菜苷具有显著的抑制作用,与其作用机理相关的信号通路包括Ca²⁺、NO、ROS等。 四、结论与展望 本研究旨在探究黄顶菊中除草活性物质的作用机理,通过研究发现,其主要成分为矢车菊苷和芹菜苷,具有显著的抑制作用,并且与其作用机理相关的信号通路包括Ca²⁺、NO、ROS等。这为研究和开发天然除草剂提供了参考。未来,我们将继续深入研究黄顶菊中除草活性物质的作用机理,并探究其应用价值,为农业生产和环境保护做出更大的贡献。