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肺癌miRNA表达谱的筛选及定量验证方法的研究综述报告
随着现代医学技术的不断发展，肺癌等恶性肿瘤的前沿研究越来越受到重视。miRNA是一类具有重要生物学功能的小分子RNA，其大量研究表明，在肺癌的发生、发展、转移过程中起着关键的调节作用。因此，对于miRNA在肺癌中的表达谱进行筛选及定量验证，已成为了相关研究领域中的核心问题。
本文旨在综述当前肺癌miRNA表达谱的筛选及定量验证方法的研究进展，并且分析其优劣，为相关领域的研究工作提供有益的借鉴。
一、肺癌miRNA表达谱的筛选方法
肺癌miRNA表达谱的筛选方法包括高通量测序技术、生物芯片技术和实时荧光定量PCR技术等。其中，高通量测序技术是当前最为流行的筛选方法。该技术可通过对肺癌组织和正常组织中miRNA的差异表达进行分析，从而筛选出表达差异显著的miRNA。高通量测序技术具有高通量、高灵敏度和高分辨率等优点，是肺癌miRNA表达谱研究的重要手段。生物芯片技术则可通过将一系列miRNA的探针固定在芯片上，通过检测肺癌组织与正常组织中探针hybridization的强度差异来判断miRNA的表达值。实时荧光定量PCR技术则通过特异性的引物和探针来进行miRNA的测量。该技术具有灵敏度高、准确性高和操作简单等优点。
二、肺癌miRNA表达谱的定量验证方法
肺癌miRNA表达谱的定量验证方法包括实时荧光定量PCR技术、原位杂交技术和免疫组织化学技术等。其中，实时荧光定量PCR技术可通过引物和探针的结合来特异性地扩增miRNA，直接量化miRNA的表达水平。原位杂交技术则通过掺入生物素探针和碱性磷酸酶探针对miRNA进行定位和检测，具有灵敏度较高的优点。免疫组织化学技术则可以通过检测miRNA在细胞和组织中的表达情况，获取相关信息指导临床治疗。不同的定量验证技术各自具有自身的特点和优劣，应根据具体情况灵活选择。
三、肺癌miRNA表达谱的研究进展
近年来，肺癌miRNA表达谱研究推陈出新，不断涌现出一系列新的研究成果。例如2018年米纳谢夫（Minashkina）等人对肺癌组织中mir-21、mir-23a、mir-210和mir-155的表达谱进行了深入研究，发现这些miRNA的高表达与肺癌的发生和发展密切相关。同时，杨婷婷（Yang）等人针对肺癌与淋巴结转移相关miRNA的表达谱，使用实时荧光定量PCR技术进行定量验证，同样得出了miR-16、miR-21、miR-93、miR-145和miR-155是与肺癌相关的显著差异表达miRNA。
总的来说，肺癌miRNA表达谱研究在肺癌相关疾病的防治方面具有重要的意义。近年来的研究发现，miRNA的表达谱分析有助于有效评价肺癌的病情和预后，并为研究这种癌症的发生、转移等分子机制及寻找治疗靶点提供了新思路。值得注意的是，尽管miRNA的研究有一定的局限性，如仅针对已知miRNA的调控方式，需要搭配其他的尚在研究中的技术来更全面系统地概括肺癌的疾病机制，但miRNA表达谱研究仍是肺癌研究中不可或缺的手段之一，在肺癌治疗中也有着广阔的应用前景。