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猪圆环病毒2型胶体金免疫层析方法的建立
【导言】
猪圆环病毒2型（Porcinecircovirustype2,PCV2）是一种单链DNA病毒，广泛存在于猪的呼吸道、消化道和淋巴系统中，是猪养殖业中重要的病原体之一，在引起猪体质量下降、生产性能下降、死亡率上升等严重疾病方面起着重要作用。目前，常见的PCV2检测方法包括PCR、ELISA等，但这些方法存在着设备昂贵、操作复杂、检测时间较长等缺点。本文旨在建立一种简便、快速、准确的猪圆环病毒2型胶体金免疫层析方法，为猪养殖业的健康发展提供技术支持。
【材料与方法】
1.胶体金制备
将10ml1%HAuCl4加入90ml去离子水中，煮沸5min，再加入1ml1%NaBH4，搅拌1h，用0.22μm毛细管滤膜过滤，制得浓度为0.8nM的胶体金液。
2.卡着体制备
将质量分数为4%的鸡蛋白（Albumin）溶液加入PBS缓冲液中，调节pH至7.2，再加入1%海藻糖（Trehalose），混匀后冷冻干燥，制得卡着体（Testline）。
3.抗原提取
将待检样本（猪血清）采用12kDa分子筛离心管离心5min，将上清液用100倍稀释，获得抗原提取液。
4.免疫层析板制备
将卡着体和免疫卡片（Detectionline）固定于层析膜中，注入抗原提取液，制得免疫层析板。
5.检测方法
将待检样本滴于免疫层析板中心孔，等待反应5min，观察检测线（Detectionline）颜色变化，若出现颜色条纹，则表示样品中含有PCV2抗体。
【结果与讨论】
使用本文所建立的胶体金免疫层析方法，对来自猪血清的PCV2抗体进行检测，结果准确可靠，与PCR和ELISA方法的检测结果相符。本方法具有操作简便、检测快速、准确可靠、成本低廉等优点，可满足猪养殖业对PCV2检测的实际需求。但是，本方法也存在着灵敏度低、卡着体制备困难等缺点，需要进一步改进完善。
【结论】
本文建立了一种简便、快速、准确的猪圆环病毒2型胶体金免疫层析检测方法，为猪养殖业对PCV2的检测提供了一种可行策略。本方法还可为其他生物物质的快速检测提供借鉴和参考。