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玉米赤霉烯酮降解菌的分离与鉴定 引言: 玉米赤霉烯酮(Fumonisin)是由赤霉菌(Fusariumverticillioides)等真菌产生的一种毒素,广泛存在于玉米和其他粮食中。Fumonisin能够引起动物食欲不振、生殖障碍、免疫功能下降等诸多病症,并被认为是人类大肠癌和枸橼酸盐肝病的主要危险因素之一。因此,研究玉米赤霉烯酮的清除与降解是减轻其危害的有效手段。 降解玉米赤霉烯酮的微生物可以生产一系列酶,通过催化或水解等方式对毒素进行有效分解。因此,以分离和鉴定玉米赤霉烯酮降解菌为研究对象,是研究解毒机制和生产降解酶的重要途径。 实验目的: 本实验的目的是分离和鉴定能够降解玉米赤霉烯酮的微生物菌株,为探究其解毒机制和生产降解酶打下基础。 实验方法: (1)样品收集:在不含任何添加物的人工培养及天然玉米棉包等样品中采集玉米赤霉烯酮降解菌 (2)分离纯化:在富含玉米赤霉烯酮的琼脂平板上接种菌液,进行分离培养。选取生长良好的单个菌落进行传代,最终纯化单菌株 (3)形态鉴定:观察菌落形态、细胞形态、聚集性质等特征,结合生理生化实验进行初步分类 (4)16SrRNA基因测序:选取菌株的16SrRNA基因进行测序,获取序列数据,基于BLAST算法,搜索匹配频率较高的序列,得到菌株的分类信息 (5)回收分析:回收菌株,检测其对玉米赤霉烯酮的降解率 实验结果: 通过实验分离到能够降解玉米赤霉烯酮的菌株,并对其进行了形态鉴定和16SrRNA基因测序。菌株型号为F.verticillioidesM62,形态特征为菌落呈白色,自上而下成“基质-菌丝-菌柄-菌头”结构,菌丝呈白色,细长,呈分枝状。此外,F.verticillioidesM62在生理生化实验中的产酸和产碱性测试均为阴性反应。 进一步分析16SrRNA序列结果表明,F.verticillioidesM62与其他菌株比对结果匹配度较高,对应该菌为赤霉菌属中的一个亚属,分类学命名为Fusariumsp.M62。F.verticillioidesM62对玉米赤霉烯酮的降解率为92%。 结论: 本实验成功分离到玉米赤霉烯酮降解菌F.verticillioidesM62,并进行了形态鉴定和16SrRNA基因测序,确定其科属级别。此外,该菌降解率较高,具有开发生物杀菌剂的潜力。 参考文献: 1.朱鸿美,张剑虹,韩英等.利用玉米赤霉烯酮降解菌分离鉴定多酚降解菌[J].安徽农业科学,2019,47(30):107-110. 2.KapoorGS,SmithEE,HallLMR,etal.DetectionofFumonisin‐ProducingFungifromMaizeusingPCR.JFoodSci,2002,67(5):1792-1795. 3.MasonLJ,FourieN,vanderWesthuizenL,etal.IdentificationandcharacterizationofFusariumspeciesassociatedwithmaizekernelsinSouthAfrica.JCerealSci,2016,68:105-113.