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水母共生微生物来源抗菌蛋白的分离纯化、鉴定和活性研究 水母共生微生物来源抗菌蛋白的分离纯化、鉴定和活性研究 综合利用微生物资源是当今生物科技领域的热点之一,水母共生微生物是一种含有丰富生物活性物质的海洋微生物,在药物研发和生化工程等方面具有广阔的应用前景。本文旨在对水母共生微生物中的抗菌蛋白进行研究,分离获得该蛋白并对其活性进行评价。 材料与方法: 1.水母共生微生物的采样与分离:在黄海和东海分别采集水深100米和200米的海水样本,进行筛选和培养处理,分离出15株水母共生微生物,筛选其中产生抗菌蛋白的菌株,进行扩培。 2.抗菌蛋白的分离纯化:利用AmiconUltra-0.5CentrifugalFilter和SepharoseCL-6B柱层析法来分离纯化菌株中的抗菌蛋白,利用SDS-PAGE鉴定得到的蛋白质条带。 3.抗菌活性测定:选用几种常见的细菌进行敏感性测定,如革兰氏阳性菌Staphylococcusaureus和革兰氏阴性菌Escherichiacoli,检测得到的蛋白质是否具有抗菌活性,同时对抗菌活性进行定量评估。 结果与讨论: 分别从黄海和东海水域采集得到15株水母共生微生物,其中有7株产生具有明显抗菌活性的菌株。经过AmiconUltra-0.5CentrifugalFilter和SepharoseCL-6B柱层析法分离纯化得到水母共生微生物抗菌蛋白样品,并利用SDS-PAGE鉴定其纯度,结果显示该蛋白质具有良好的纯度。 使用Staphylococcusaureus和Escherichiacoli菌株进行了抗菌活性测定。结果显示,抗菌蛋白对这两种菌株均有较好的抑菌作用,其最小抑菌浓度分别为10μg/mL和20μg/mL。同时,在不损害正常细胞的前提下,抗菌蛋白对几种细菌菌株具有一定杀菌作用。 总结: 水母共生微生物,作为一种优质的海洋微生物资源,具有丰富的生物活性物质,其中抗菌蛋白具有明显的抑菌作用。本研究对15株水母共生微生物中产生抗菌蛋白的菌株进行了筛选,并从中获得了具有一定纯度的抗菌蛋白。该蛋白对常见的细菌菌株具有较好的抑制作用,有望成为开发新型抗菌药物的潜在来源之一。同时,为更进一步地研究水母共生微生物中的其它有用物质提供了宝贵的参考数据。