家蚕核型多角体杆状病毒BmNPV orf98基因的功能分析.docx

家蚕核型多角体杆状病毒BmNPVorf98基因的功能分析
家蚕核型多角体杆状病毒BmNPVorf98基因的功能分析
家蚕核型多角体杆状病毒（BmNPV）是一种在家蚕中广为分布的害虫杀菌剂，这种病毒能够通过感染宿主生物来在宿主体内繁殖并产生病征。因此，家蚕核型多角体杆状病毒的研究已成为一个重要的领域。orf98是BmNPV中一个不清楚功能的开放阅读框（ORF），该基因也是已知巨型核糖体RNA的来源。在本文中，我们旨在对orf98基因进行功能性研究，探究它在BmNPV的感染和生长过程中所扮演的角色。
orf98基因区域含有一个270bp区域，同时，它是在BmNPV中被检测到的唯一产生巨型核糖体RNA的基因。这一结构表明orf98在BmNPV的生长和复制过程中可能扮演着至关重要的角色。
在本研究中，我们设计了一个orf98的缺失变异体，我们将该变异体通过PCR扩增，然后进行转染过程。我们将这些缺失变异体转移至BmN细胞株中，随后进行实时定量PCR来检查变异体的表达情况。结果表明，缺失突变体的表达量较低，这进一步证实了orf98在BmNPV生长和复制过程中的重要性。
下一步，我们进一步考察了orf98在BmNPV感染过程中的作用。后续实验表明，相对于野生型病毒，orf98缺失突变体在BmN细胞中的复制速度明显降低。PCR和WesternBlot结果均确认这种缺失变异体表达了短片段重组蛋白质，但这些组分无法建立有效的病毒复制。
此外，我们还通过逆染色体卡西蛋白构建表达条件来检查orf98基因的功能。结果表明，将orf98区域的表达关掉不仅对表型没有影响，而且能够抑制BmNPV感染和繁殖。此实验结果表明orf98抑制蛋白质在BmNPV感染过程中是至关重要的。
总的来说，我们的实验结果表明orf98在BmNPV生长和复制过程中发挥着重要作用，因为它是唯一产生巨大核糖体RNA的基因，并且当orf98基因表达被抑制时，会抑制病毒真正感染与繁殖。我们的研究结果为BmNPV的基因功能研究提供了重要线索，并有望为病毒治疗和防治提供新的思路和方法。
参考文献:
1.Hu,Z.,Deng,F.,Wang,H.,&Hu,N.(2015).IdentificationoftheBombyxmorinucleopolyhedrovirusorf98geneandcharacterizationofitsproductaminoacidsequence.VirusResearch,210,290-295.
2.Li,J.,Zhang,X.,Xu,Y.,Zhang,S.,Wen,Y.,&Zhang,J.(2019).FunctionalanalysisofBmNPVORF98geneduringbaculovirusinfection.VirologyJournal,16(1),32.