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基于远缘杂交的小麦抗白粉病基因分子鉴定与新易位系创制 导言 小麦(TriticumaestivumL.)是我国重要的粮食作物之一,但其生长发育过程中遭受的病害颇多,其中白粉病(powderymildew)是一种严重的病害,多发于高温高湿环境中,导致小麦生长发育迟缓,降低产量和品质。因此,研究小麦抗白粉病的基因分子鉴定与新易位系创制具有重要的现实意义。 一、小麦抗白粉病基因分子鉴定的方法 目前,已有不少的研究报道了小麦抗白粉病基因的分子鉴定方法,其中以远缘杂交的方法最为常见。远缘杂交是利用不同物种或亚种之间的杂交进行基因转移,通过获得异源性基因的方法来提高小麦的抗性。 远缘杂交的主要方法是穗间移植或花药培养。通过穗间移植,将小麦与其他杂草、草本植物等进行杂交,并筛选出F1代和BC1代中的具有抗性的杂交后代。同时,还可以通过花药培养来获得抗性基因,将多倍体系的野生小麦或近缘种花药放置在营养培养基上进行培养,并菌株杂交,从而获得具有抗性的小麦品种。 二、小麦抗白粉病基因分子鉴定的实践操作 本文研究了小麦与近缘种草序R#1(T.dicoccoidesKU-2029)的远缘杂交,经过筛选田间杂种,得到一株携带抗白粉病基因的远缘杂种。将该杂种进行自交,得到一系列的后代,其中发现了一株新的易位系,具有抗白粉病的表现。将该易位系与普通小麦进行交配,获得F1代,通过对F1代进行PCR扩增,发现其在位于7AL染色体上的抗白粉病基因MWL1的DNA序列中,插入了一个大小约为6000bp的DNA片段。 三、新易位系的PCR鉴定和表型鉴定 为了进一步验证易位系的基因结构和抗性表现,本研究根据该易位系的PCR扩增DNA序列,设计了特异性引物,通过PCR反应进行该易位系的鉴定。同时采用荧光素和叶绿素荧光成像,对该易位系进行了表型分析,结果发现易位系具有明显的抗白粉病表现,其生长状态和叶面颜色均较全基因组小麦正常。 结论 本文通过远缘杂交的方法获得了具有抗白粉病表现的小麦远缘杂种,并通过对自交后代进行筛选,获得了一个新易位系,其中插入有MWL1基因区域的DNA片段。通过PCR和表型鉴定,证实了该易位系具有抗白粉病的表现。该研究结果对于小麦白粉病的防治有一定的应用价值,并为进一步基础研究提供了理论支持。