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BMP-2、bFGF转染BMSCs与牙胚细胞联合培养对成牙基因的影响
引言
牙齿的形成是一种复杂的过程，涉及到多个成牙基因的表达和调节。其中，牙胚细胞和骨髓间充质干细胞（BMSCs）被认为是牙齿发育的重要细胞来源。因此，通过对BMSCs和牙胚细胞联合培养，可以模拟牙齿发育过程，研究成牙基因的表达和调控机制。同时，通过转染生长因子，如骨形态发生蛋白-2（BMP-2）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF），可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力。
本文旨在探讨BMP-2和bFGF转染BMSCs和牙胚细胞联合培养对成牙基因的表达和调控机制的影响。
材料与方法
1.细胞培养
从SD大鼠的下颌尖端收集牙胚组织和骨髓组织，分别通过组织学分离法获得牙胚细胞和BMSCs。牙胚细胞和BMSCs分别在10%FBS的alpha-MEM和DMEM/F12培养基中培养，温度为37°C，5%CO2。
2.转染BMP-2和bFGF
BMSCs和牙胚细胞分别在12孔板上培养至80%的密度。将125ng/mL的BMP-2和10ng/mL的bFGF加入到每个孔中的培养基中，进行转染。转染时间为48小时。
3.联合培养
将转染后的BMSCs和牙胚细胞以1:1的比例混合，加入新的培养基中，进行联合培养。联合培养时间为7天。
4.实时荧光定量PCR
采用实时荧光定量PCR技术检测BMSCs和牙胚细胞联合培养后成牙基因的表达情况。将RNA提取出来，并进行逆转录反应。然后使用实时荧光定量PCR检测成牙基因的表达水平。
结果
1.转染BMP-2和bFGF可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力。
2.联合培养可以模拟牙齿发育过程，并促进成牙基因的表达。
3.BMP-2和bFGF对成牙基因的表达有不同的影响。转染BMP-2可以促进牙本质形成相关基因，如DSPP和DMP-1的表达。而bFGF转染可以促进牙釉质形成相关基因（AMEL和ENAM）的表达。
讨论
联合培养BMSC和牙胚细胞可以模拟牙齿发育过程，并促进成牙基因的表达。其中，BMP-2和bFGF转染可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力，并作用于不同类型的成牙基因。具体而言，BMP-2可以促进牙本质形成相关基因如DSPP和DMP-1的表达，而bFGF可以促进牙釉质形成相关基因（AMEL和ENAM）的表达。这些结果表明，BMP-2和bFGF在牙齿的形成和修复过程中具有重要作用。
结论
联合培养BMSCs和牙胚细胞可以模拟牙齿发育过程，并促进成牙基因的表达。BMP-2和bFGF转染可以增强BMSCs和牙胚细胞的增殖和分化能力，并作用于不同类型的成牙基因的表达。这些结果有助于深入了解牙齿的发育和修复机制，并为牙齿的再生医学提供新的思路。