DNA重组技术的基本工具.doc

专题1第1节DNA重组技术的基本工具（共1课时）
[学习目标]
说出基因工程的概念。
简述DNA重组技术所需三种基本工具的作用。
认同基因工程的诞生和发展离不开理论研究和技术创新。
[新课导入]
思考：
1、试说出抗虫棉的获得过程。

苏云金芽孢杆菌
普通棉花(无抗虫特性)
①提取
抗虫基因
棉花细胞(含抗虫基因)
棉花植株(有抗虫特性)
重组DNA
③导入
②形成
2、抗虫棉的获得过程运用了什么技术？

3、什么是基因工程？有什么特点？

4、培育抗虫棉的关键步骤需要哪些工具？

[学习活动]
活动一、限制性核酸内切酶――“分子手术刀”
阅读课本P4－5“限制性核酸内切酶”相关内容并观察图1－2和图1－3，思考下列问题：
1、限制性核酸内切酶主要分布在什么生物中？推测这种酶在这些生物中的作用是什么？

2、限制性核酸内切酶具有什么特点？作用部位是什么？作用结果是什么？

3、黏性末端和平末端有什么不同？

活动二、DNA连接酶――“分子缝合针”
阅读课本P5－6“DNA连接酶”相关内容并观察图1－4，思考下列问题：
1、DNA连接酶有什么作用？作用部位是什么？

2、DNA连接酶可分为哪二类？分别从哪种生物中获得？

3、二种DNA连接酶作用有什么不同？

4、不同生物的DNA能连接的原因是什么？

5、DNA连接酶和DNA聚合酶是一回事吗？为什么？

6、与DNA分子相关的酶
种类限制酶DNA连接酶DNA聚合酶解旋酶作用底物DNA分子DNA分子片段脱氧核苷酸DNA分子作用部位作用特点切割目的基因及载体，能专一性识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开将双链DNA片段“缝合”起来，恢复被限制酶切开了的两个核苷酸之间的磷酸二酯键只能将单个脱氧核苷酸添加到脱氧核苷酸链上将DNA两条链之间的氢键打开作用结果形成黏性末端或平末端形成重组DNA分子形成新的DNA分子形成单链DNA分子
活动三、基因进入受体细胞的载体――“分子运输车”
阅读课本P6“基因进入受体细胞的载体”相关内容，思考下列问题：
1、运载体有作用是什么？

2、作为运载体必须具备哪些条件？

3、基因工具中使用的载体有哪些？最常用是哪一种？

4、真正被用作载体的质粒都是天然的吗？

[课堂反馈]
1、关于限制酶的说法中，正确的是（）
A、限制酶是一种酶，只识别GAATTC碱基序列
B、EcoRI切割的是G—A之间的氢键
C．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA
D．限制酶只存在于原核生物中
2、DNA连接酶催化的反应是()
A．DNA复制时母链与子链之间形成氢键B．黏性末端碱基之间形成氢键
C．两个DNA片段黏性末端之间的缝隙的连接D．A、B、C都不正确
3、作为基因的运输工具——载体，必须具备的条件及理由是()
A、能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制，以便提供大量的目的基因
B、具有多个限制酶切点，以便于目的基因的表达
C．具有某些标记基因，以便为目的基因的表达提供条件
D、能够在宿主细胞中复制并稳定保存，以便于进行筛选
5、关于质粒的叙述正确的是()
A、质粒是能够自我复制的环状DNA分子B、质粒是唯一的载体
C、重组质粒是目的基因D、质粒可在宿主外单独复制
6、下图为DNA分子在不同酶的作用下所发生的变化，图中依次表示限制性核酸内切酶、DNA聚合酶、DNA连接酶、解旋酶作用的正确顺序是 ()

A．①②③④ B．①②④③
C．①④②③ D．①④③②
7、下列DNA片段能够用DNA连接酶连接起来的是()
eq\a\vs4\al(…GC,…CG,①)eq\a\vs4\al(G…,TGCAC…,②)eq\a\vs4\al(GT…,…GC,③)eq\a\vs4\al(…CTGCA,…G,④)eq\a\vs4\al(GC…,CG…,⑤)eq\a\vs4\al(…G,…CTTAA,⑥)
A．①和⑤ B．①和⑤、②和④
C．①和③ D．①和③、④和⑥
8、下列有关限制性内切酶识别的叙述，不正确的是 ()
A．从反应类型来看，限制性内切酶催化的是一种水解反应
B．限制性内切酶的活性受温度、pH的影响
C．一种限制性内切酶只能识别双链DNA中某种特定的脱氧核苷酸序列
D．限制性内切酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的几率就越小
9、下列关于染色体和质粒的叙述，正确的是 ()
A．染色体和质粒的化学本质都是DNA
B．染色体和质粒都只存在于原核细胞中
C．染色体和质粒都与生物的遗传有关
D．染色体和质粒都可作为基因工程的常用载体
10、（多选）某DNA分子中含有某限制酶的一个识