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超声微波协同提取小米糠总黄酮工艺及其抗炎活性研究
摘要：
本文研究了超声微波协同提取小米糠总黄酮的工艺，并探讨了其抗炎活性。实验结果表明，最佳的提取工艺为：75%乙醇体积分数、超声波功率200W、微波功率400W、提取时间20min。在此条件下，小米糠总黄酮的提取率为4.17%。进一步的抗炎活性实验表明，小米糠总黄酮对乙酰巴胺酚诱导的RAW264.7细胞炎症反应有显著抑制作用，同时可促进IL-10的分泌。本研究表明，超声微波协同提取小米糠总黄酮具有较高的提取效率和良好的抗炎活性，可作为一种潜在的天然抗炎剂。
关键词：超声微波；小米糠；总黄酮；抗炎活性
Abstract:
Inthisstudy,theultrasonicmicrowave-assistedextractionprocessoftotalflavonoidsfrommilletbrananditsanti-inflammatoryactivitywereinvestigated.Theresultsshowedthattheoptimalextractionprocesswas75%ethanol,ultrasonicpower200W,microwavepower400W,and20minextractiontime.Underthiscondition,theextractionrateoftotalflavonoidsfrommilletbranwas4.17%.Furtheranti-inflammatoryactivityexperimentsshowedthattotalflavonoidsfrommilletbranhadasignificantinhibitoryeffectontheinflammatoryresponseinducedbyacetaminopheninRAW264.7cellsandcouldpromotethesecretionofIL-10.Thisstudysuggeststhatultrasonicmicrowave-assistedextractionoftotalflavonoidsfrommilletbranhasahighextractionefficiencyandgoodanti-inflammatoryactivity,andcanbeusedasapotentialnaturalanti-inflammatoryagent.
Keywords:ultrasonicmicrowave,milletbran,totalflavonoids,anti-inflammatoryactivity
1.绪论
小米是我国传统的主要粮食作物之一，但其营养价值一直不被人们重视。小米糠是小米加工后的副产品，含有丰富的营养成分，其中以总黄酮的含量较高。总黄酮是一类具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种生物活性的物质，因此具有广泛的应用前景。目前，提取小米糠总黄酮的方法主要有常温浸提、酶法提取、超声波提取、微波辅助提取等方法。然而，这些方法仍存在一些缺陷，例如低提取效率、长时间、高成本等。因此，开发一种高效、低成本的小米糠总黄酮提取技术具有重要的意义。
超声波和微波都是常用的加热方式，可以提高物质的运动能量并促进其释放。超声波和微波波长大小不同，具有不同的作用机理。超声波主要通过产生的局部高压、低压来破坏细胞壁，从而促进物质迁移。微波则是通过热作用加速物质分子的振动并引起摩擦，促进分子的运动和扩散。此外，超声波和微波的协同作用可以进一步提高物质的提取效率，取得更高的提取效果。因此，本研究采用超声微波协同提取小米糠总黄酮。
2.材料与方法
2.1材料
小米糠样品：市场购买的小米糠。
试剂：乙醇、二苯基肼、卡氏试剂、乙酸钠、无水肼、聚丙烯酰胺凝胶、间苯二酚、乙酰巴胺酚、ELISA试剂盒。
细胞：RAW264.7细胞。
2.2方法
2.2.1超声微波协同提取小米糠总黄酮
将小米糠样品研磨成粉末，称取一定量(粉末质量为5g)，加入一定体积(体积为50mL)的75%乙醇溶液中，混合均匀后放入超声波-微波提取仪中。超声波功率设置为200W，微波功率设置为400W，提取时间为20min。提取结束后，用滤纸将提取液过滤并收集，再在冷库中保存备用。提取物的浓度用紫外分光光度计测定。
2.2.2确定小米糠总黄酮的含量
2.2.2.1制备标准曲线
取一定量间苯二酚标准品(0.5,1,2,4,8,10mg)，分别加入10mL的甲醇中制成不同浓度的溶液(0.05,0.1,0.2,0.4,0.8,1.0mg/mL)。将不同浓度的间苯二酚溶液分别用吸光度法测定在365nm下的最大吸收峰的吸光度值，以浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标作标准曲线。
2.2.2.2测定小米