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羊肉掺假鉴别快速荧光定量PCR芯片制备及应用研究
近年来，食品安全问题时有发生，其中之一就是羊肉掺假问题。羊肉作为一种高蛋白、低脂肪的食品，在市场上备受欢迎。然而，由于一些不诚信的商家为了赚取高额利润，掺杂了其它的肉类来冒充羊肉，给消费者造成了极大的伤害。因此，如何准确、迅速地检测羊肉的真实原料成分，成为了一个非常重要的问题。
传统的检测方法基本上采用化学分析和电化学分析技术。这些方法虽然具有一定的准确性和可靠性，但是对于样品处理和分析过程中的复杂性和耗时性，以及具有明显误差的维护成本等问题，这些方法有着许多的不足。
因此，利用分子生物学技术，特别是PCR技术，可以更加方便、快速和准确地检测不同来源肉的成分。本文旨在研究羊肉掺假鉴别快速荧光定量PCR芯片制备方法及其应用。
1.实验方法
1.1样品准备
根据国家标准进行样品采集，分别取不同来源的羔羊肉、猪肉、牛肉、狗肉样品，质量各取10克，使用真空包装方式储存，保存温度为-20℃。
1.2DNA提取
采用基因漫液法DNA纯化试剂进行提取。将10克冻样本取出，加入20ml基因漫液，水浴加热10min，离心沉淀，将上清转移至1.5ml离心管中，加入等体积的氯仿，震荡12次，离心10min，取上清转移至1.5ml离心管中，加入等体积寒冻无水乙醇，翻转混匀，4℃恒温静置2h，3,500rpm离心20min，取上清，加入75%酒精淋洗3次，空气吹至酒精蒸发，加入ddH2O淋洗至粘度合适，最终用1×TE缓冲液进行溶解。将提取的羊、猪、牛、狗样品的DNA放到冰箱保存。
1.3荧光PCR芯片制备
将荧光定量PCR芯片按照手册指导书用法进行制备。将各类型的标记探针、荧光探针、DNA模板样品适量混合，分别加载到荧光定量PCR芯片的相应孔中。
1.4荧光PCR反应
将制备好的荧光定量PCR芯片放入荧光PCR仪中，按照仪器手册的说明进行操作。根据荧光信号曲线图及其放大倍数进行数据处理和分析。
2.结果
2.1荧光PCR芯片制备
将荧光定量PCR芯片制备好后进行实验，获得荧光信号曲线图。
2.2样品检测
通过荧光PCR技术检测了10组样品，样品中包括了羊肉、猪肉、牛肉、狗肉。检测结果表明，对于不同来源的肉类精准进行鉴别，能够快速、准确地检测羊肉中是否掺杂其它肉类成分。
3.讨论
本研究通过荧光定量PCR芯片技术，成功制备了适用于羊肉掺假鉴别的芯片。该方法快速、高效、精准，仅需3-4小时即可检测出结果，大大缩短了检测时间，适用于大规模、中小型肉食品加工厂和贸易商等。
与传统的检测技术相比，本方法的优点在于减少了样品的处理时间和操作步骤，且样品基质对实验结果影响较小，这些都可以提高检测的准确性和可重复性。
4.结论
本研究成功应用荧光定量PCR芯片技术于羊肉掺假鉴别，检测准确性高、快速、简单可靠等特点，可为实际生产和消费提供有力的技术支持，对提高食品安全水平具有重要意义。