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斐林试剂置换法测定还原糖的含量一、试验原理斐林试剂中酒石酸钾钠铜是一个氧化剂,反应终点可用次甲基蓝作指示剂,在碱性、沸腾环境下还原呈无色。依据斐林试剂完全还原所需还原糖量,计算出样品还原糖量。二、试剂与材料4、碱式滴定管 5、样品溶液:待测G液 样品1:稀释20倍,1000ml/班 样品2:稀释50倍,1000ml/班 6、电炉 三、操作方法B电炉上加热至沸,并保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝溶液,趁沸以每两秒1滴速度继续滴加葡萄糖标准溶液用0.2%标准G滴定至蓝色消失,有红棕色沉淀,溶液清亮为终点止。统计耗用G量为V0,必须在1min内完成。 注意:还原次甲基蓝易被空气中氧氧化,恢复成原来蓝色,所以滴定过程中必须保持溶液成沸腾状态,而且防止滴定时间过长。2、定糖预备试验 同1法取斐林试剂,加10ml样品液,摇匀于电炉上加热至沸,保持微沸2分钟,加2滴1%次甲基蓝,用0.2%G滴定至蓝色消失。统计耗用G量为V13、样品中还原糖测定 同上法吸收斐林试剂加10ml样品液(预先稀释),补加(V0—V1)ml水,并从滴定管中预先加入(V1-1)ml0.2%G,摇匀至电炉上加热至沸,保持2min微沸,加入2滴1%次甲基蓝,继续用G滴定至蓝色消失。统计消耗标准G体积为V毫升。四、结果计算五、注意事项分别用葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖标准品配制标准溶液分别滴定等量已标定费林氏液,所消耗标准溶液体积有所不一样。证实即便同是还原糖,在物化性质上仍有所差异,所以还原糖结果只是反应样品整体情况,并不完全等于各还原糖含量之和。假如已知样品只含有某种还原糖,则应以该还原糖做标准品,结果为该还原糖含量。假如样品中还原糖成份未知,或为各种还原糖混合物,则以某种还原糖做标准品,结果以该还原糖计,但不代表该糖真实含量。五、分析讨论 六、思索题: 1、查阅资料还原糖测定检测方法有哪些?其原理是什么? 2、总结本试验方法检测还原糖应注意哪些事项?