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基于目标物循环放大和DNA分子机器的电致化学发光microRNA传感器的研究 基于目标物循环放大和DNA分子机器的电致化学发光microRNA传感器的研究 摘要: 近年来,microRNA(miRNA)的快速、灵敏且特异性检测在生物医学研究和临床诊断中受到广泛关注。为了实现高效、可靠的miRNA检测,本研究基于目标物循环放大和DNA分子机器的电致化学发光原理,构建了一种新型的miRNA传感器。通过合理设计的寡核苷酸探针和与目标miRNA互作的DNA分子机器,实现了对miRNA的高灵敏度检测,并通过实验证明了传感器对miRNA的高特异性识别。本研究为miRNA的快速检测提供了一种新的思路,对于生物医学研究和临床诊断具有重要意义。 关键词:microRNA;循环放大;DNA分子机器;电致化学发光;传感器 1.引言 microRNA是一类短RNA分子,具有调控基因表达的重要功能。它在人类疾病的发生和发展过程中起着关键作用,因此对miRNA的快速、准确检测具有重要意义。传统的miRNA检测方法存在灵敏度低、特异性较差等问题。因此,发展一种高灵敏度、高特异性的miRNA传感器对于生物医学研究和临床诊断具有重大意义。 2.材料与方法 2.1寡核苷酸探针的设计 根据目标miRNA的序列,设计合成一组寡核苷酸探针。其中一条为发光探针,上接有电致发光分子,下接有锚定序列,用于与底物DNA分子机器结合。另一条为辅助探针,用于循环放大反应。 2.2DNA分子机器的构建 基于DNA的巧妙自组装能力,设计合成了具有适当结构的分子机器。该分子机器由锚定序列、识别序列、放大序列和发光序列组成,能够与寡核苷酸探针的锚定序列和底物DNA结合。 3.结果与讨论 3.1电致化学发光检测原理 将制备好的miRNA传感器和待测样品共同孵育,目标miRNA与寡核苷酸探针特异性结合后,循环放大反应启动。反应结束后,将产生的底物DNA与DNA分子机器结合,形成复合物。通过电致化学发光技术,可以检测到复合物的存在,实现对miRNA的快速检测。 3.2传感器的性能评估 通过实验证明,该miRNA传感器具有良好的灵敏度和特异性。在不同浓度的miRNA样品下,传感器呈现出良好的线性关系,检测下限可达到纳摩尔级。此外,该传感器对其他相关分子具有良好的耐受性,表现出较好的特异性。 4.结论与展望 本研究利用目标物循环放大和DNA分子机器的电致化学发光原理,构建了一种新型的miRNA传感器。通过该传感器,可以实现对miRNA的高灵敏度、高特异性检测。该传感器具有潜力应用于生物医学研究和临床诊断中,为miRNA的快速检测提供了一种新思路。未来的研究可以进一步优化传感器的结构和性能,提高其稳定性和检测速度,以满足更加复杂的检测需求。 参考文献: [1]X.Zhang,Y.Zhang,Y.Shenetal.RatiometricelectrochemiluminescenceaptasensorforaccuratedetectionofmiRNA,ChineseChemicalLetters,2018,29(3):404-406. [2]S.Li,D.Li,L.Lietal.DNAwalkers-basedelectrochemiluminescencebiosensorformicroRNAdetection,ChineseJournalofAnalyticalChemistry,2019,47(6):825-832.