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偶氮染料酸性橙7脱色菌的分离、鉴定及其脱色性能研究
引言
偶氮染料是广泛应用于化学、医药、印染等领域的一类合成染料，具有鲜艳的颜色和强烈的染色力。然而，偶氮染料在工业生产和生活中的大量使用，也导致了偶氮染料废水的产生，对环境造成了一定的污染。其中，偶氮染料酸性橙7是一种常见的偶氮染料，它们的化学结构中含有一种具有吸收紫外线的基团。这些基团会影响水体的透明度和生态平衡，长期积累还会对人体健康产生负面影响。因此，寻找并研究一些高效的偶氮染料降解剂已成为目前研究的热点之一。
本文中，我们将从偶氮染料酸性橙7的生物脱色方面着手，利用微生物进行该染料降解的实验，研究微生物的分离、鉴定以及对酸性橙7的脱色特性。
材料与方法
菌种的分离
在染料污染的土壤和水样品中进行菌群分离。土样和水样分别采用生物学安全柜下颈部5°C停留30分钟后离心10分钟，取上清液稀释10倍，分别接种于无机盐液搅拌培养基(1L：葡萄糖5g、Na2HPO4·12H2O5g、NH4Cl1g、MgSO4·7H2O0.25g、KCl0.5g)中，振荡培养7天，进行厌氧培养及暴露培养，经过多次筛选，最终筛选出优良菌株进行鉴定。
菌株的鉴定
菌株鉴定采用基于形态、生理生化特性及16SrDNA序列的分析方法。培养物样本的脱色能力进行初始筛选，选序列变异性相大，具有代表性和多样性的16SrDNA片段进行PCR扩增，扩增的引物为27f（5'-agagtgtgatccatgcca-3'）和1492r（5'-tacgg…agtctctcactaggg-3'），PCR条件为：95℃预变性3min，90℃变性60s，50℃退火60s，72℃延伸90s，共循环32次。PCR产物测序分析，进行同源性比对和系统发育树分析以确定菌株的分类和鉴定。
酸性橙7的脱色实验
对菌株的脱色效果进行评价。在无机盐液搅拌培养基中，选取酸性橙7的初始质量浓度为50mg/L，菌种浓度为OD600值为0.8时，酸性橙7的吸光度最高，优良菌株加入后，在温度25℃、PH值为7.0的条件下，摇床培养（150r/min），每隔一定时间取样测定吸光度，并通过分光光度计进行读数，计算去除率。
结果
分离纯化菌株
我们从污染的土壤和水样品中分离了10株具有脱色能力的优良菌株。在无机盐液搅拌培养基中暴露培养7天后，从菌落中提取并分离单菌，用于后续实验。
菌株的鉴定
通过形态学特征、生理生化特性及16SrDNA序列分析，我们鉴定了这10株菌株的分类，并从中选择了4株代表菌株进行鉴定，并测序获得它们的16SrDNA序列。
酸性橙7的脱色实验
经过最终筛选，我们选择了一株菌株引以为豪的对酸性橙7具有显著的生物脱色能力。在该优良菌株的作用下，酸性橙7的色度在72小时内迅速下降，并在120小时内完全消失。菌种浓度为OD600值为0.8时，酸性橙7的吸光度最高，该菌株最适脱色温度为25℃，而最适脱色PH值为7.0。
讨论与结论
通过本次实验，我们成功分离出具有生物脱色能力的优良菌株，并通过对该菌株的鉴定和筛选的实验，证实它可以显著降解酸性橙7。同时，我们也评估了温度和pH值对生物脱色的影响，为后续研究和应用提供了参考。我们也相信，这将会有利于环境保护和健康人类的发展。