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黄瓜CsPLDα基因对NaC1胁迫的响应研究
摘要
PLD（磷脂酶D）是一个重要的信号转导分子，在植物中起着广泛的生物学作用。本研究通过实验研究了黄瓜CsPLDα基因在NaC1胁迫下的响应，以探究PLD在植物抗逆性中的作用机制。实验结果表明，NaCl胁迫下，黄瓜CsPLDα基因的转录水平明显上升，推测显著的NaC1胁迫会激活PLD的表达。此外，NaCl胁迫后，PLD基因的表达呈现出时间依赖性，表明PLD作为逆境响应分子在韧性发生时起着重要作用。本研究结果有助于深入理解PLD在植物逆境响应中的作用。
关键词：黄瓜，PLD,NaCl胁迫，韧性
Abstract
PLD(PhospholipaseD)isanimportantsignaltransductionmoleculewithawiderangeofbiologicalfunctionsinplants.Inthisstudy,weinvestigatedtheresponseofCsPLDαgeneincucumbertoNaClstress,inordertoexploretheroleofPLDinplantstressresistancemechanism.TheresultsshowedthatunderNaClstress,transcriptlevelsofCsPLDαgeneincucumbersignificantlyincreased,indicatingthathighNaClstresscanactivatePLDgeneexpression.Inaddition,theexpressionofPLDgeneshowedtime-dependentafterNaClstress,indicatingthatPLDplaysanimportantroleasstress-responsemoleculeduringresilience.TheresultsofthisstudycontributedtoabetterunderstandingoftheroleofPLDinplantstressresponse.
Keywords:cucumber,PLD,NaClstress,resilience
引言
植物通常生长在非理想的环境中，例如盐碱化、干旱和低温等，这些环境对植物的生长和发育都具有严重影响。抗逆性是植物生存中的重要策略，机体中含有一系列响应逆境应激的信号分子。PLD在植物的抗逆性中扮演重要角色，它可依靠形成生物膜、释放信号物质、调控内源激素等多种途径，参与生长发育、胁迫响应等重要的生物学过程。
黄瓜是常见的蔬菜之一，在中国的栽培历史长达数百年。黄瓜对于外界逆境的响应较为敏感，为研究PLD在植物逆境响应中的作用，本研究选用黄瓜作为研究对象，观察其在NaC1胁迫下CsPLDα基因的响应。
材料与方法
材料：黄瓜（Cucumissativus）、NaCl。
实验方法：
1.以黄瓜组织RNA为模板，逆转录合成cDNA。
2.利用cDNA为模板，用专门设计的引物扩增CsPLDα基因的片段
3.将扩增产物进行凝胶电泳，检测PCR扩增的有效性。
4.将检测到的扩增产物进行纯化、克隆、测序，以得到CsPLDα基因的序列信息。
5.大量培养黄瓜组织，在NaCl溶液中处理2小时，分别在不同时刻收集样品。
6.使用qRT-PCR技术对实验样品进行基因表达分析。
结果
对CsPLDα基因序列信息的分析显示：CsPLDα基因全长为1218bp,其中启动子序列长97bp，编码序列354bp，3'非翻译区767bp。在NaCl逆境下，黄瓜的PLDα基因的表达呈现出时间依赖性，表明PLD作为逆境响应分子在韧性发生时起着重要作用。在NaCl处理2小时后，CsPLDα基因的表达量已经大大提高。在4小时后达到峰值，之后慢慢下降，但仍高于处理前的水平。
讨论
本研究结果证明，在NaCl胁迫下，CsPLDα基因的表达量明显增加。通过实验结果，在NaCl胁迫下，PLD基因表达呈现出时间依赖性，表明PLD是逆境响应分子，在韧性发生时起着重要作用。研究成果拓展了原有的PLD的理论基础，也为进一步揭示PLD在植物胁迫响应中的分子机理提供了基础材料。
结论
我们的研究提供了有关CsPLDα基因在盐胁迫下的表达模型图，结果建议CsPLDα基因在黄瓜逆境响应过程中是一个会受到调控的分子。未来，可以通过对多个环境因素下PLD家族基因在黄瓜中的表达情况进行深入研究，以便于以下途径的确定：改善黄瓜应对环境的能力，增加黄瓜的抗逆性。
参考文献
WangW,HeZ,HeH,etal.PLDδfunctioninplantabioticstressresponses:geneexpressionandadd