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鼠伤寒沙门氏菌刺激对鸡十二指肠上皮细胞增殖与凋亡的影响
摘要
本研究通过体外培养鸡十二指肠上皮细胞，研究了鼠伤寒沙门氏菌刺激对其增殖与凋亡的影响。结果显示，鼠伤寒沙门氏菌刺激能够显著抑制上皮细胞的增殖，同时促进细胞的凋亡，但是对于不同浓度的刺激作用则存在一定差异。本研究结果对于进一步探究鼠伤寒沙门氏菌与上皮细胞相互作用具有一定的参考价值。
关键词：鼠伤寒沙门氏菌，上皮细胞，增殖，凋亡
一、前言
鼠伤寒沙门氏菌是一种能够引起人和动物发生肠胃道感染的细菌。感染后会导致腹泻、发热等症状，极端情况下可能会危及生命。鼠伤寒沙门氏菌病的发生与动物农产品的卫生状况密切相关。目前，对于该细菌与肠道上皮细胞之间的相互作用尚未有明确的研究，因此本研究旨在探究鼠伤寒沙门氏菌刺激对上皮细胞增殖与凋亡的影响，明确该细菌与上皮细胞的交互作用关系。
二、材料与方法
1.材料
1.1鸡十二指肠上皮细胞
1.2鼠伤寒沙门氏菌
1.3DMEM培养基
1.4FBS血清
1.5MTT试剂盒
1.6AnnexinV-FITC/PI染色试剂盒
2.方法
2.1培养上皮细胞
首先，从健康的鸡体内取出十二指肠，清洗后切成小块，用1%胰蛋白酶酶解液消化1小时。然后将消化产物振荡离心，去除上清液，放入DMEM培养基中振荡培养。
2.2细菌培养
将鼠伤寒沙门氏菌接入LB培养基并在37℃的恒温下静置培养至OD值达到0.6。
2.3刺激实验
将培养好的上皮细胞分别加入不同浓度的鼠伤寒沙门氏菌，包括20、40、60、80CFU/ml，同时添加1%FBS血清，细胞培养在体外24小时。实验组设3组，每组分别有3个重复。
2.4细胞增殖测定
将不同浓度的MTT试剂加入上皮细胞中，培养4小时后取出，加入DMSO溶解后与试剂盒中颜色显色反应，最终通过ELISA分析仪测定OD值。
2.5细胞凋亡测定
将不同浓度的刺激后的上皮细胞细胞分别加入AnnexinV-FITC/PI染色试剂盒，离心后用PBS洗涤，最终通过荧光显微镜观察细胞凋亡情况。
三、结果
3.1细胞增殖
实验结果显示，鼠伤寒沙门氏菌刺激对上皮细胞增殖产生了明显的抑制作用。随着刺激浓度的增加，增殖抑制作用也随之增强，其中，80CFU/ml的刺激作用最为显著。
3.2细胞凋亡
实验结果显示，刺激后的上皮细胞经过AnnexinV-FITC/PI染色可以清晰地观察到细胞凋亡的情况。随着刺激浓度的增加，凋亡率也随之增加，其中80CFU/ml的刺激作用最为显著。
四、讨论
本研究通过对鸡十二指肠上皮细胞进行体外培养，研究了鼠伤寒沙门氏菌刺激对其增殖与凋亡的影响。实验结果显示，鼠伤寒沙门氏菌刺激能够明显抑制上皮细胞的增殖，同时促进细胞的凋亡。而不同浓度的刺激作用则存在一定差异，80CFU/ml的刺激作用最为显著。
研究表明，鼠伤寒沙门氏菌可能会直接作用于肠道上皮细胞，对其造成伤害性作用，从而导致感染后发生的症状。此研究结果对于进一步探究鼠伤寒沙门氏菌与上皮细胞相互作用具有一定的参考价值。
五、结论
本研究结果显示，鼠伤寒沙门氏菌刺激能够显著抑制鸡十二指肠上皮细胞的增殖，同时促进细胞的凋亡。不同浓度的刺激作用则存在一定差异。本研究结果对于探究鼠伤寒沙门氏菌与上皮细胞相互作用的机制具有一定的参考价值。