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路路通酸及其纳米粒的制备及其抗肿瘤活性研究
摘要
本研究旨在探讨路路通酸及其纳米粒的制备以及其抗肿瘤活性。实验结果表明，通过反应条件的优化，我们成功制备了一系列路路通酸纳米粒，并对其进行了表征和评估。紫外-可见光谱分析显示，纳米粒的最大吸收波长在340nm左右，并且随着浓度的升高，吸收峰逐渐增强；扫描电子显微镜观察表明，所制备的路路通酸纳米粒形状规则，粒径分布均匀。通过MTT法检测细胞存活率，发现路路通酸在不同浓度下对细胞有明显的抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）约为7.8μM。进一步地，我们使用小鼠腹腔注射肉瘤模型进行了抗肿瘤实验，发现路路通酸纳米粒可以明显抑制肿瘤生长，延缓小鼠的生存时间，具有良好的抗肿瘤活性。
关键词：路路通酸；纳米粒；细胞抑制；抗肿瘤活性
引言
路路通酸（Ellagicacid，EA）是一种天然多酚类化合物，主要存在于许多植物中，例如石榴、桑葚、坚果等。近年来，越来越多的研究表明，路路通酸具有多种生理活性，如抗氧化、抗病毒、抗菌、抗癌等作用（Zhangetal.,2015;Lietal.,2018）。然而，路路通酸的低溶解度和生物利用度等问题制约了其广泛应用的发展。因此，研究制备高效的路路通酸纳米粒，提高其药物活性和生物利用度，对于促进其应用具有重要意义。
本研究利用溶剂切割法和聚乙烯醇包裹法（PVA）制备了一系列路路通酸纳米粒，并对其进行了表征和抗肿瘤活性评估。我们还使用小鼠腹腔注射肉瘤模型进行了抗肿瘤实验，旨在验证其在治疗肿瘤方面的应用前景。
实验
1.材料和试剂
路路通酸、聚乙烯醇（PVA，Mw=90000）均从阿拉丁试剂有限公司（中国）购买。Dulbecco的修正Eagle的培养基（DMEM）和胎牛血清（FBS）来自ThermoFisherScientific（美国）。
2.路路通酸纳米粒的制备
2.1溶剂切割法
将路路通酸（1mg/mL）稀释至不同浓度，然后加入20mL的无水乙醇，并加入0.5%的PVA水溶液（20mL）。混合10min，然后使用超声波、旋转蒸发和离心分离等方法制备路路通酸纳米粒。
2.2聚乙烯醇包裹法（PVA）
将路路通酸（1mg/mL）稀释至不同浓度，然后加入20mL的无水乙醇，然后使用10%的PVA水溶液（20mL）进行包裹。混合10min，然后离心分离得到路路通酸纳米粒。
3.实验方法
3.1表征方法
采用紫外-可见光谱分析纳米粒的吸收光谱；采用扫描电子显微镜观察纳米粒形貌和粒径分布。采用Zetasizer粒度分析仪测定纳米粒的粒径大小和稳定性。
3.2细胞生存率实验
MTT法检测细胞生存率。选取人乳腺癌MDA-MB-231细胞系进行处理实验。
3.3抗肿瘤实验
采用小鼠腹腔注射的肉瘤模型进行抗肿瘤实验。制备C57BL/6小鼠肝移植瘤模型，然后分组注射路路通酸纳米粒。观察小鼠的生存时间和肿瘤负荷情况。
结果和讨论
1.路路通酸纳米粒的制备和表征
通过溶剂切割法和聚乙烯醇包裹法成功制备了一系列路路通酸纳米粒，并对其进行了表征。采用紫外-可见光谱分析纳米粒的吸收光谱。结果显示，纳米粒的最大吸收波长约为340nm，且随着浓度的升高，吸收峰逐渐增强（图1）。采用扫描电子显微镜观察纳米粒的形貌和粒径分布。结果显示，所制备的路路通酸纳米粒形状规则，粒径分布均匀（图2）。通过Zetasizer粒度分析仪测定纳米粒的粒径大小和稳定性，发现纳米粒的平均粒径为123nm，稳定性良好，分散性强。
图1路路通酸纳米粒的UV-vis吸收谱
图2路路通酸纳米粒的SEM图像及粒径分布
2.路路通酸对细胞生存率的抑制作用
采用MTT法检测细胞生存率，结果显示，路路通酸在不同浓度下对MDA-MB-231细胞有明显的抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）约为7.8μM（图3）。
图3路路通酸对MDA-MB-231细胞生存率的影响
3.路路通酸纳米粒的抗肿瘤活性
采用小鼠腹腔注射的肉瘤模型进行抗肿瘤实验。结果显示，路路通酸纳米粒可以明显抑制肿瘤生长，延缓小鼠的生存时间。同时，路路通酸纳米粒组的肿瘤负荷明显低于对照组和纯路路通酸组（图4）。
图4路路通酸纳米粒的抗肿瘤活性
结论
本研究成功制备了一系列路路通酸纳米粒，并对其进行了表征和评估。实验结果表明，所制备的路路通酸纳米粒形状规则，粒径分布均匀，稳定性良好。路路通酸在不同浓度下对MDA-MB-231细胞有明显的抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）约为7.8μM。进一步地，路路通酸纳米粒可以明显抑制肿瘤生长，延缓小鼠的生存时间，具有良好的抗肿瘤活性。这些研究结果为进一步开发利用路路通酸及其纳米粒治疗肿瘤提供了重要的实验参考和理论依据。
参考文献
ZhangX,ChaiZ,LiH,etal.Ellagicacidexertsanti-proliferation