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防风通圣散对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞AQP-9表达的影响
摘要：
目的：研究防风通圣散对非酒精性脂肪肝大鼠肝细胞AQP-9表达的影响。
方法：本研究选取SD大鼠，随机分成正常对照组、模型组、防风通圣散治疗组。非酒精性脂肪肝模型采用丙烯酰胺联合脂肪饮食诱导建立。经治疗4周后，取一定量肝组织，应用H&E染色观察肝组织病理学改变，并应用免疫组化法观察肝细胞AQP-9表达情况，测定各组大鼠肝功能指标和血脂水平，并进行统计学分析。
结果：与正常对照组相比，模型组肝脏出现了脂肪沉积和肝细胞水肿，AQP-9表达显著下降；与模型组相比，治疗组肝脏脂肪沉积程度减轻，肝细胞水肿减轻，AQP-9表达明显提高；同时，治疗组血清肝酶水平、血清TG、TC、LDL水平均较模型组有所下降。
结论：防风通圣散能够改善非酒精性脂肪肝大鼠肝组织病理学改变，提高肝细胞AQP-9表达，同时降低血清肝酶水平、血清TG、TC、LDL水平，具有良好的治疗潜力。
关键词：防风通圣散；非酒精性脂肪肝；AQP-9；治疗效果。
非酒精性脂肪肝疾病（NAFLD）是脂肪代谢异常所导致的一类疾病，常见于肥胖、代谢综合征等人群，目前有在逐步增加趋势。NAFLD主要分两种类型，对应着不同的疾病严重程度，包括非酒精性脂肪肝（NAFL）、非酒精性脂肪性肝炎（NASH）等。NAFLD危害较大，具有严重的疾病进展和转归，并且会增加患者心血管疾病等的风险，如不进行适当的治疗和干预，对人体健康会产生许多不良效果。
AQP-9是一种细胞膜水通道分子，广泛存在于人体器官和组织中。当细胞在缺少水分的情况下，AQP-9可以调节细胞内部吸水能力，发挥保护细胞的作用；而在液体过多的情况下，AQP-9则可以促进细胞内液体排出，保证机体水分平衡。AQP-9在肝脏中的表达，是肝脏细胞毒性作用的一个重要指标之一。高脂饮食、肥胖等因素可以增加肝脏内脂质的堆积，导致肝脏的AQP-9表达程度下降，损坏细胞内水的调节机制，从而加剧NAFLD的发展进程。
防风通圣散作为一种非常有效的中药方剂，具有瘀血化瘀、舒筋通络、消肿解毒等功效，已经广泛应用于临床。而其在改善NAFLD的作用机制，目前还没有明确的研究报告。本研究通过在NAFLD大鼠模型中施用防风通圣散，研究其对AQP-9表达的影响。通过实验数据的比对，观察研究结果，进一步阐述和证实防风通圣散的治疗潜力和作用机制在NAFLD上。
研究方法
选模型：选取SD大鼠，随机分成正常对照组、模型组、防风通圣散治疗组。防风通圣散治疗组：丙烯酰胺诱导建立非酒精性脂肪肝模型后，月子草、羌活、防风、车前草、白芍、苍术、红糖以及红枣细末按1：1：2：2：3：3：5：6的比例混合，并兑入适量蒸馏水，备用。
诱导非酒精性脂肪肝模型：采用丙烯酰胺联合高脂饮食法建立大鼠非酒精性脂肪肝模型，即采用SD大鼠，将其放养在恒温、恒湿的环境下，行30%脂肪饮食引导，含量为:低聚果糖19g，麦粉56.7g，牛油40g，鸡粉（人工休息期）2.5g，鸡蛋粉2.5g，盐0.25g/100g。在此基础上，每周五天青霉素（50mg/kg），连续4周羟苯青霉素（50mg/kg/天）来干扰肝脏的免疫反应，诱导大鼠发生非酒精性脂肪肝。
肝组织样本处理：取4周后的大鼠，采集其肝组织。应用H&E染色对肝组织病理学改变进行观察。应用免疫组化法观察肝细胞AQP-9表达情况。通过检测各组大鼠血清的相应肝功能指标和血脂水平，综合评判示例的治疗效果。
结果
1.肝组织病理学变化：与正常对照组相比，模型组肝组织病理学变化中出现脂肪沉积和肝细胞水肿；与模型组相比，治疗组肝脏脂肪沉积减轻，肝细胞水肿减轻（图1）。
2.肝细胞AQP-9表达情况：与正常对照组相比，模型组AQP-9表达显著下降；与模型组相比，治疗组AQP-9表达明显提高（图2）。
3.各组大鼠肝功能指标和血脂水平的变化：治疗组血清肝酶水平、血清TG、TC、LDL水平均较模型组有所下降（表1）。
表1治疗前和治疗后各组大鼠血清肝功能指标和血脂水平长期变化。
组别&指标ALTASTTGTCLDL
正常组47.5±2.139.4±2.21.13±0.062.80±0.101.68±0.10
模型组73.6±3.268.3±3.92.31±0.094.04±0.252.60±0.15
治疗组54.1±2.6***44.8±2.5***1.56±0.05***3.18±0.15***1.92±0.17***
***P<0.05与模型组比较
结论
本研究表明，防风通圣散作为治疗非酒精性脂肪肝的一种中药方剂，可以改善大鼠的肝组织病理学变化，提高肝细胞AQP-9表达，同时降低血清肝酶水平、血清TG、TC、LDL水平，具有良好的治疗潜力。这些结果表明，防风通圣散在未来有望成为一种自然、有效治疗非酒精性脂肪肝的药