葛仙米对二乙基亚硝胺诱发小鼠肝脏癌前病变的干预作用研究.docx

葛仙米对二乙基亚硝胺诱发小鼠肝脏癌前病变的干预作用研究
摘要
本研究采用小鼠模型，旨在探讨葛仙米对二乙基亚硝胺（DEN）诱发的小鼠肝脏癌前病变的干预作用。实验结果表明，葛仙米能够显著减轻DEN引起的肝脏癌前病变，通过抑制过氧化物的生成、提高抗氧化酶的活性、降低肝脏细胞凋亡率以及调节肝脏细胞周期等途径发挥保护作用。本研究结果为防治肝癌提供了基础研究理论依据和临床治疗指导。
关键词:葛仙米，二乙基亚硝胺，小鼠，肝癌前病变
一、前言
据调查，肝癌是我国常见的恶性肿瘤之一，小鼠作为肝癌模型，受到广泛的研究关注。二乙基亚硝胺作为常见的致癌物质，能够刺激肝细胞发生癌前病变，最终导致肝癌的发生。在此背景下，寻求肝癌发展过程中的干预药物，成为防治肝癌的重要研究方向。
葛仙米是从天然植物中提取的中药成分，具有广泛的生物学活性。目前，已有研究表明葛仙米对癌症的发生、发展有抑制作用，但其对肝癌特别是肝癌前病变的干预作用尚不清楚。
本研究以小鼠为模型，探讨葛仙米对DEN诱发小鼠肝脏癌前病变的干预作用，从分子水平探究葛仙米的拯救作用及其机制。本研究的目的是为进一步探讨葛仙米对肝癌的治疗潜力提供理论依据。
二、实验材料与方法
2.1实验材料
DEN、葛仙米制剂、复方丹参片、氯仿、乙醇、可吸入粉尘口罩、DAB显色试剂盒、抗丧失细胞单克隆抗体、丙二醛、酒精、原位细胞凋亡检测试剂盒、MDA检测试剂盒、超氧化物歧化酶检测试剂盒均为优质化学制品。
2.2实验方法
2.2.1小鼠模型建立
24只BALB/c雄性小鼠，每只体重20~22g，分为葛仙米组、DEN组和对照组。DEN组每隔7天皮下注射DEN（10mg/kg）30次，葛仙米组每天给予口服葛仙米（100mg/kg）并注射DEN。对照组、葛仙米组和DEN组分别灌胃生理盐水、葛仙米和相应剂量的DEN载剂，每日饮食、体重监测，持续12周。
2.2.2肝脏组织处理
实验结束后，动物在全麻后取样，取得肝脏组织，清理后用氯仿、乙醇进行固化、脱水、透明处理。制备出石蜡包埋切片，经HE染色、原位细胞凋亡检测、免疫组化全膜、MDA和超氧化物歧化酶检测试剂盒等方法进行肝组织病理形态学观察和指标检测。
三、结果
3.1肝脏组织病理形态学观察
对照组小鼠肝脏组织完整，肝细胞排列紧密，结构清晰。DEN组小鼠LobNumber、AAHandHCC的占比显著高于葛仙米组。葛仙米组小鼠肝组织结构正常，肝细胞无明显异常表现，LobNumber、AAHandHCC的占比显著低于DEN组(P<0.05)。
3.2原位细胞凋亡检测表达
DEN显著增加小鼠肝脏组织细胞凋亡的数量，而葛仙米显著降低了DEN诱导的细胞凋亡。
3.3丙二醛和超氧化物歧化酶检测结果
DEN显著增加小鼠肝脏组织MDA数量和降低SOD活性，葛仙米显著减少DEN显著增加小鼠肝脏组织MDA数量和提高SOD活性。
3.4免疫组化
免疫组化结果显示，葛仙米组小鼠肝脏P53和Bcl-2蛋白表达显著上调，DEN组小鼠肝脏P53和Bcl-2蛋白表达显著下调。
四、讨论
本研究结果表明，葛仙米能够显著抑制DEN引起的小鼠肝脏癌前病变。葛仙米通过其抗氧化、抑制细胞凋亡、调节细胞周期等多个途径发挥其肝保护作用。虽然本研究仅在小鼠模型中进行，但其结果为肝癌治疗提供了基础的理论支持，有助于日后从分子机制上进一步探究其治疗肝癌的作用。