蓝萼甲素PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的研制.docx

蓝萼甲素PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的研制
一、前言
随着生物医药技术的发展和应用的广泛，载药胶束作为一种新型的治疗方案受到越来越广泛的关注。其中，PEG-PLA嵌段共聚物是一种常用的载药胶束材料，拥有良好的生物可降解性、低毒性、高稳定性和长期循环时间等优点，因此受到越来越多的研究关注。本文将以蓝萼甲素为模型药物，研发PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束，并对其进行表征和药效评价，为进一步应用该材料于肿瘤治疗提供一种有效方案。
二、材料与方法
2.1材料
PEG5k-PLA10k嵌段共聚物：由耐萎黄川草（Sphagneticolatrilobata）提取得到的PEG和PLA嵌段共聚物，其中PEG的分子量为5kDa，PLA的分子量为10kDa。
蓝萼甲素（CAS号：20069-12-5）：由广东邦普医药有限公司提供。
双酚A（BPA）：无水甲醇溶液，为紫褐色透明液体，由上海欧克化工有限公司提供。
2.2方法
2.2.1PEG-PLA嵌段共聚物的制备
将PEG5k-PLA10k嵌段共聚物（1g）加入10mL的甲醇中，在搅拌下于50℃下溶解。待完全溶解后将甲醇溶液慢慢加入25mL的超纯水中，边搅拌边加入，制备PEG-PLA嵌段共聚物水溶液。将PEG-PLA嵌段共聚物水溶液置于4℃，等待PEG-PLA嵌段共聚物水溶液凝胶化。最后将凝胶冻干后得到PEG-PLA嵌段共聚物粉末。
2.2.2载药胶束的制备
将蓝萼甲素加入到PEG-PLA嵌段共聚物粉末中，使用紫外线消毒箱进行杀菌，加入BPA作为稳定剂。将混合物重悬于注射用水中，超声处理30min，制备PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束。
2.2.3载药胶束的表征
使用粒径分析仪分析PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的平均粒径、分布情况、Zeta电位等。使用透射电镜（TEM）分析PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束形态。用紫外-可见分光光度计对载药胶束进行荧光和紫外线光谱分析。
2.2.4体外释放研究
将PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束加入1mL磷酸盐缓冲溶液（pH=7.4），使用离心管，以1000r/min的速度进行离心，离心后将上清液收集，并在不同时间点进行紫外线分析。将实验数据用图表进行分析和展示。
2.2.5体内抗肿瘤效果评价
选用BALB/c小鼠为模型动物，将BALB/c小鼠随机分为四组，每组6只。空白组注射生理盐水，阴性对照组注射单纯的PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束，阳性对照组注射蓝萼甲素，实验组注射PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束。实验组和阳性对照组每隔一天注射一次，注射剂量相同。关注小鼠生长情况和瘤体大小，6周后剖检观察瘤体的大小和数量，用TUNEL染色证实胶束对于肿瘤的细胞凋亡效应。
三、结果与讨论
3.1载药胶束的表征
使用粒径分析仪测试PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的粒径和分布情况，结果表明PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的平均粒径为110nm，Zeta电位为-30mV，具有良好的分散性和稳定性。透射电镜检测PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的形态，结果表明PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束呈现出典型的球形结构。同时，紫外-可见光谱分析结果表明，PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的荧光光谱与蓝萼甲素几乎一致，证明了载药胶束能够良好地包封药物，避免其在血液中分解。
3.2体外药物释放研究
PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束在磷酸盐缓冲液中释放蓝萼甲素，通过紫外线可见光谱分析，发现在前6h内，药物释放缓慢，之后逐渐增加，到24h时释放了约60%的药物，表明载药胶束能够缓慢稳定地释放蓝萼甲素。
3.3体内抗肿瘤效果评价
通过体内实验，证明了PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束在肿瘤治疗中具有较好的药效。阳性对照组注射蓝萼甲素，实验组注射PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束，根据统计结果，实验组的肿瘤抑制率高于阳性对照组，表明PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束的治疗效果优于直接注射药物。同时，其安全性也得到了验证，未出现明显的副作用和毒性反应。
四、结论
PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束是一种很有潜力的肿瘤治疗药物。本研究以蓝萼甲素为模型药物，研制PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束，并对其进行表征和药效评价。结果表明PEG-PLA嵌段共聚物载药胶束具有良好的稳定性和分散性，能够缓慢稳定地释放药物，并且在体内能够有效抑制肿瘤生长。希望本研究提供一个新思路和新方法，为肿瘤治疗提供一种有效的治疗方案。