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蛹虫草培养基中多糖的分离纯化及其乙酰酯糖的生物活性研究
蛹虫草是一种具有生命力的菌类，传统上被用作中药材。近年来，蛹虫草多糖成为了研究的热点，有着许多研究表明其具有多种保健、免疫调节以及治疗肿瘤的活性。本文旨在研究蛹虫草多糖的分离纯化以及乙酰酯糖的生物活性，并探讨其可能的机制。
一、蛹虫草培养基中多糖的分离纯化
1.实验材料
蛹虫草培养基、无菌水、超声波处理器、密闭瓶。
2.实验方法
（1）蛹虫草培养基准备
将蛹虫草体分解开来，取其子实体(即蛹)约35克，与15ml无菌水混合，加入250ml的蛹虫草培养基中，使其分别在30℃和28℃下培养7d。
（2）多糖的提取
将培养结束的两个获得物混合，通过超声波处理器破碎细胞壁，离心，取上清液加5倍体积的无菌水，加混凝土除气器加压10min，等离子灭菌，使其得到多糖提取工作液。
（3）多糖的分离纯化
将多糖提取工作液冷沉淀一夜，去除上清液，留下沉淀，加无菌水再次悬浮使用离心机离心，除去上清液，剩下含多糖的沉淀，将沉淀洗净，加入无菌水混合离心，多次取舍。将洗净的多糖沉淀取出，采用DEAE-52阴离子交换树脂进行柱层析，用蒸馏水进行洗涤，分别用0.2mol/lNaCl和0.5mol/lNaCl进行梯度洗脱，每次洗脱用1ml/tube分别收集。
（4）多糖的检测
收集到的不同分数管中网孔皿进行描述。
二、蛹虫草多糖乙酰酯糖的生物活性研究
1.实验材料
多糖样品、生长发育良好的BALB/c小鼠各60只，球菌溶血素、灵芝多糖作为阳性对照，生理盐水作为阴性对照，ELISA试剂盒。
2.实验方法
（1）多糖复式样品的制备
在多糖样品中加入2%乙酰化剂，加入聚乙二醇进行半乳聚合，磺酸化、纯化，然后将样品冷干燥，制备乙酰酯糖。
（2）免疫活性
将BALB/c小鼠随机分为阴性（生理盐水）、阳性（球菌溶血素和灵芝多糖）和实验组（样品中的乙酰体），每个组别中各20只。给小鼠按照10g/kg的剂量进行组内灌胃，并在组内进行5个回合。每种样品的匹配剂量均为抗体水平在1/1000的范围内。
（3）ELISA实验
在杀死小鼠之后，将其取出，细胞溶解并抽提，用ELISA实验进行检测，比较各组之间抗体水平的差异。
三、结论与探讨
本实验中，通过对蛹虫草培养基中多糖的分离纯化，得到了提取工作液和纯化的多糖，然后对多糖进行乙酰化处理，得到了乙酰酯糖，并进行了免疫活性实验。结果表明，蛹虫草多糖乙酰酯糖具有较好的免疫活性，且比例并不高，需要进一步的研究来探究其具体机制。
总之，通过分离纯化蛹虫草培养基中的多糖，并制备乙酰酯糖，本实验对蛹虫草多糖的生物活性进行研究，得出结论，但是其中的机制还需要进一步的研究。不过，从这次实验中我们可以看到蛹虫草多糖的潜力和发展前景。