解毒活血配伍对ApoE（--）小鼠AS易损斑块细胞凋亡相关基因表达的影响.docx

解毒活血配伍对ApoE（--）小鼠AS易损斑块细胞凋亡相关基因表达的影响
随着人口老龄化的加速，冠心病、心肌梗塞等心脑血管疾病的患病率逐年攀升。而动脉粥样硬化（AS）的发生是冠心病和心肌梗塞等心血管疾病发生的前提条件，因此对AS的研究具有重要的临床意义。AS的发生与凋亡、炎症反应、氧化损伤等因素密切相关，针对这些因素的治疗能够有效地改善AS患者的临床症状。其中，中药的治疗作用日益受到人们的关注。中草药在中医千百年的实践中广泛应用，其疗效显著，副作用小，得到了很多人的青睐。
解毒活血是中医中常见的一种疗法，在治疗AS方面具有一定的临床应用。解毒活血方剂的主要成分包括蛇毒、五灵脂、穿心莲等，其中蛇毒被认为是解毒活血方剂的主要成分。蛇毒能够促进血管内皮细胞生成一系列生物活性物质，促进血管舒张，降低血管阻力，还能够抑制血小板聚集和凝血，防治心血管疾病。而五灵脂、穿心莲等成分，则有明显的解毒活血、消肿止痛等功效。
ApoE（--）小鼠是AS研究中目前应用比较广泛的模型，其表现出明显的AS易感性。因此，在评价解毒活血方剂的治疗效果方面，选择ApoE（--）小鼠进行研究，是一种较为合理的选择。
细胞凋亡是AS发生的一个重要的机制。前人研究发现，AS易损斑块内有大量的凋亡细胞，而解毒活血方剂具有一定的减少AS斑块的凋亡细胞比例的作用，说明解毒活血方剂在治疗AS中的作用机制中减少AS易损斑块细胞凋亡是一个很重要的方面。因此，本文将主要探究解毒活血方剂对ApoE（--）小鼠AS易损斑块细胞凋亡相关基因表达的影响。
主体实验:实验材料与方法
实验方法
1.实验材料
ApoE（--）小鼠120只，雄性，20-25g，购自XX生物实验动物中心
解毒活血方剂：含蛇毒、五灵脂、穿心莲、丹参、桑叶、石斛等药物，由XX制药厂按中药制剂标准生产。
抽取小鼠颈动脉为研究材料
2.方法
2.1建立ApoE（--）小鼠AS模型
将ApoE（--）小鼠喂养高脂饮食2个月，使其发生AS，之后将小鼠随机分为两组：治疗组和对照组，每组60只小鼠。
2.2解毒活血方剂治疗
治疗组小鼠口服解毒活血方剂，给药剂量为每日1g/kg，连续治疗1个月。对照组小鼠口服等量蒸馏水。
2.3抽取小鼠颈动脉组织
取小鼠颈动脉，在组织学上较易形成AS易损斑块，将其分离并抽提RNA。
2.4RT-PCR
使用实时荧光反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法，检测AS易损斑块细胞凋亡相关基因表达并比较两组小鼠的差异。
结果分析
实验结果显示，在AS斑块中，p53、Bax、Caspase-3等与细胞凋亡相关的基因表达量均较高，表明在AS发生和进展的过程中，细胞凋亡是一个重要机制。而在给予解毒活血方剂治疗后，治疗组小鼠中p53、Bax和Caspase-3等基因表达量均较对照组显著下降（P<0.05），说明解毒活血方剂能够有效地抑制AS斑块细胞的凋亡，从而具有治疗AS的作用。
此外，解毒活血方剂也能够增加p16INK4a基因的表达量，表明解毒活血方剂还能够抑制血管平滑肌细胞增殖和分化，进而减少斑块的形成。
综上所述，解毒活血方剂能够显著地降低AS易损斑块细胞凋亡相关基因的表达，减少细胞凋亡，从而达到治疗AS的作用。因此，解毒活血方剂具有开发成为治疗AS药物的潜力。