抗精子抗体检测ppt课件.ppt

抗精子抗体的检验诊断在男性：
抗精子抗体（antispermatozoaantibody,AsAb）属于自身抗体，它通过影响精液的质量而降低生育能力。

在女性：
抗精子抗体属于同种异体抗体，是女性免疫性不孕的重要原因。（一）、男性抗精子抗体的产生

男性产生的主要机制是血睾屏障因疾病或创伤受损，使隐蔽的精子或其可溶性膜抗原溢出，刺激机体免疫系统产生抗精子自身抗体。
抗精子抗体的产生可以抑制精子的活动和受精，造成男性不育。（二）、女性抗精子抗体的产生

精子抗原对女性属同种异体，正常情况下并不产生精子抗原产生精子的免疫反应。

原因：
1、精子膜不表达经典MHC-I类抗原
2、阴道上皮是复层鳞状上皮
3、精浆中存在抑制精子抗原表达的免疫抑制物质
4、性交后，进入输卵管精子数目少
5、独特型抗体和抗独特型抗体网络，控制着体内免疫反应
6、酶系统，能降解精子抗原（二）、女性抗精子抗体的产生原因

1、独特型抗体和抗独特型抗体网络功能紊乱
2、酶系统缺陷
3、对精子过敏与感染有关
4、生殖道病毒和细菌感染
5、生殖道创伤及炎症至生理屏障破坏
（三）、抗精子抗体分类

1、根据抗体存在的部位：循环抗体，局部抗体
2、根据球蛋白类型：IgG、IgM、IgA
3、根据作用部位：头部、顶体、体部、尾部
4、根据抗原性质：不同的精子抗原成分产生相应的不同抗体，主要有一下几种：（1）精子特异抗原：7种抗原：3种特异性，4种精浆交叉抗原
（2）精子膜抗原来自精囊液
（3）精子酶：LDHx透明质酸酶
（4）组织交叉抗原：精子表面有脑、肾上腺、甲状腺等组织的交叉抗原
（5）血型抗原：A、B血型抗原
（6）组织相容性抗原HLA-A、HLA-OR-H-Y抗原
（7）细菌交叉抗原（四）、抗体导致不孕的机制

影响精子运动
抑制精子活动
AsAb的Fc段与宫颈粘蛋白结合
补体参与使精子死亡
抗体调理作用促进精子被吞噬
补体参与受精卵死亡

（五）、抗精子抗体的检验方法

抗精子抗体按对精子的作用分为凝集性、制动性、和结合型三类。据这些特点设计了多种方法，目前常用的方法有：
试管－玻片凝集试验测定抗精子抗体：
2.精子制动试验测定抗精子抗体：
3.ELISA法测抗体：
4.间接免疫荧光法测定抗精子抗体：
5.免疫珠试验测定抗精子抗体：

1.试管－玻片凝集试验（TSAT）测定抗精子抗体：

原理：精子悬液与待测血清在缓冲盐水中反应，待测血清中的AsAb与精子表面抗原结合，使精子出现头对头，尾对尾或头对尾的凝集现象。

结果：≥10%凝集为阳性。

评价：此法最易检测头对头精子凝集，主要用于分析女性血清，方法简便，但可受多种因素干扰，如微生物、组织碎片、血中雄激素升高，均可发生非特异性凝集。
每次试验应设对照组。
2.精子制动试验测定抗精子抗体：

原理：在补体存在的条件下，精子制动抗体与精子表面抗原反应，使补体活化，导致精子失去活动能力。

结果：若为制动抗体，使精子失去活力，制动值≥2为阳性。

评价：此法仅能检测作用于精子尾干的抗体，特异性强，敏感性差，假阴性率较高。

精子制动试验阳性者的妊娠率明显低于低于精子凝集试验阳性者。3.ELISA法测抗体：

原理：以特异性精子可溶性抗原包被反应板微孔，待测血清中如存在AsAb，则可与之结合，再加入酶标抗人IgG抗体和酶底物/色原溶液，出现呈色反应。呈色强度可反应AsAb的水平。

结果：显色深浅与抗精子抗体的量成正比。

评价：结果客观准确。由于完整精子包被易致非特异性吸附，因此若以可溶性精子膜抗原包被，则本法敏感、特异、客观、定量能确定抗体类型，且易操作。生物素-亲合素酶联免疫吸附法（BA-ELISA）

（BA-ELISA）是在常规ELISA基础上发展起来的新一代
定量检测法，其敏感法性、特异性超过常规法。但很难购到交理想的试剂盒，通常试剂盒难尽人意思，结果不太稳定，假阳性太多。
4.间接免疫荧光法测定抗精子抗体：

原理：将正常人精子充分洗涤后，包被于载玻片上，依次加待测血清河异硫氰酸荧光素标记得抗人IgG、IgA、IgM多价或单价抗体，反应后洗涤，置荧光显微镜下观察。

评价：试验中需要甲醇固定，致使精子膜损伤，内部抗原外露，而内部抗原的抗体在常人中普遍存在，故假阳性多，无临床实用价值。

改进：作液相培养，试验过程中无需固定，又重新确定了本法的使用价值。此法灵敏度高，可作抗原定位，但重复性差。5.免疫珠试验测定抗精子抗体：

免疫珠试验是WHO推荐用于检测精子表面IgG、IgA、IgM类抗精子抗体的一种方法。利用兔抗人免疫球蛋白抗体（抗人IgG、抗人IgA、抗人IgM）包被的聚丙烯酰胺微珠能结合于结合了精子表面的精子抗体，在显微镜下可看到免疫珠随精子运行。

结果：若结合一个或多个免疫珠的精子比