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甘蓝型油菜高抗菌核病OguCMS恢复系的分子标记辅助选择
摘要：
油菜是重要的油料作物之一，但在生产中经常受到核病的侵袭，导致产量的大幅下降。本研究旨在筛选出高抗菌核病的甘蓝型油菜OguCMS恢复系，并通过分子标记辅助选择技术进行优良材料的筛选，最终找到抗菌核病的分子标记，为油菜的抗病育种提供参考。
一、引言
油菜（BrassicanapusL.）是我国主要的油料作物之一，具有种子产量丰富，油脂含量高、蛋白质含量丰富等优点，是我国重要的食用和工业油料作物。然而，在油菜生产中核病是一种普遍存在的病害，攻击的部位为油菜的果实和茎部，严重的情况下可能导致果实掉落、形成空心果等，严重影响油菜的产量和质量。
目前，对油菜核病的控制主要采用化学农药处理，但是这种方式容易导致农药残留、病菌抗药性的产生等问题，对人类和自然环境都会造成不良影响。因此，研究油菜的抗病育种具有重要的理论和现实意义。
二、材料与方法
1.材料
本实验选用了甘蓝型油菜OguCMS恢复系的F_2群体，由一组A品种与OGuCMS资料基因光氧化还原ATP酶（orf224）敲除体系交配获得，且在前期的抗菌核病鉴定中，该群体显示出非常明显的差异。
2.方法
(1)抗菌核病鉴定
在亩施用100g底施蒿汁发酵肥，亩施用100g底施蒿汁发酵肥+液体肥料(氨基酸为基质)为指导，用均一细菌菌液根据土壤类型调节浓度为10^8cfu/mL。施菌前开沟，水田情况下沟深为5-6厘米，旱田为8-10厘米，沟内加入菌液，在施菌后浇透水，待菌液渗透，迅速埋土。
(2)株高、主茎粗、千粒重、叶绿素含量的测定
采用统计学方法分析差异，得到区分不同品系的杂交组合。
(3)DNA提取、PCR扩增和基因分型
通过PCR扩增，筛选出有意义的基因检测位点，建立基因型。基因型的确定与油菜单倍体和倍性的特殊情况，一般常采用扩增产物长度多态性（AFLP）技术、简单序列重复（SSR）技术、随机扩增多态性DNA（RAPD）、序列标记技术（SCAR）等方法。在鉴异时注意对不同类型标记同时测定，可以得到更好的区分效果。
三、结果与分析
1.抗菌核病鉴定
经抗菌核病鉴定，我们初步筛选出一批高抗菌核病的甘蓝型油菜OguCMS恢复系，这些品系具有在接种人工菌液后表现出较强的抗病性状，可以作为油菜抗病育种的重要材料。
2.DNA提取、PCR扩增和基因分型
通过PCR扩增和基因分型，我们成功确定了一些有意义的基因检测位点，并在这些位点上进行了分子标记的筛选和验证。通过这些分子标记，我们成功地区分了各个品系之间的差异，并分析了这些品系之间的遗传关系。
3.品系的选择与优化
将分子标记相关指标纳入育种导向，确定通用多效育种基因检测位点，并利用这些指标对材料进行筛选和优化。最终，我们成功地选出了一些具有较强的抗菌核病性状的品系，这些品系成为油菜抗病育种中的重要遗传资源。
四、结论
1.本研究通过抗菌核病鉴定和分子标记辅助选择技术，筛选出了一批高抗菌核病的甘蓝型油菜OguCMS恢复系，并成功地区分了各个品系之间的差异和遗传关系。
2.本研究的结果为油菜的抗病育种提供了重要的参考，可以促进油菜抗病育种的进展，并在一定程度上解决油菜生产中的病害问题。
3.基于分子标记辅助选择技术的研究，有望为今后育种工作提供更加有效的手段和技术支持，为油菜产业的发展做出更大的贡献。