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硝基油酸抑制高糖诱导的人腹膜间皮细胞上皮--间充质转化
硝基油酸抑制高糖诱导的人腹膜间皮细胞上皮-间充质转化
摘要：
人腹膜间皮细胞（humanperitonealmesothelialcells,HPMCs）是腹腔内脏器外侧腹膜表面的一种上皮细胞。在糖尿病患者中，高血糖条件下，HPMCs可能发生上皮-间充质转化（epithelial-to-mesenchymaltransition,EMT），促进腹膜透析患者的透析膜纤维化。本研究旨在探究硝基油酸（nitratedoleicacid,OA-NO2）对高糖诱导的HPMCsEMT的影响。结果表明，OA-NO2可显著抑制高糖诱导的HPMCsEMT，其机制可能涉及氧化应激、PI3K/AKT、Wnt/β-catenin和TGF-β/Smad4信号通路的调控。这些发现为研究腹膜透析膜纤维化的机制以及开发相应的治疗策略提供了新的思路。
关键词：硝基油酸，高血糖，腹膜间皮细胞，上皮-间充质转化，透析膜纤维化
1.引言
腹膜透析是治疗尿毒症患者的常用方法之一。然而，腹膜透析患者在长期的治疗过程中容易发生透析膜纤维化，限制透析效果。透析膜纤维化的发生与透析液中的高葡萄糖浓度有关。已有研究表明，在高糖条件下，腹膜间皮细胞（pMRI-1040）可能发生上皮-间充质转化（EMT），从而促进纤维化的发生。因此，寻找有效的药物来抑制HPMCsEMT对治疗透析膜纤维化具有重要意义。
硝基油酸是一种有潜力的生物活性脂肪酸代谢产物，其具有多种生物活性，包括抗炎、抗肿瘤和抗氧化等作用。最近的研究表明，硝基油酸（OA-NO2）可以抑制某些细胞的EMT过程。因此，我们推测OA-NO2可能具有抑制高糖诱导的HPMCsEMT的潜力。
2.材料与方法
2.1细胞培养
使用培养基对HPMCs进行培养，其中心培养基包括DMEM/F-12添加了10%胎牛血清。根据实验需要，将细胞分为三组：对照组、高糖组和OA-NO2处理组。
2.2高糖诱导
将细胞培养至80%的融合度后，将培养基换为高糖培养基，继续培养48小时。高糖培养基组中的葡萄糖浓度为25mM。
2.3OA-NO2处理
在高糖培养基条件下，将OA-NO2添加到培养基中，继续培养48小时。
2.4免疫荧光染色
通过免疫荧光染色法检测细胞上皮-间充质转化相关标志物。
2.5Westernblot
Westernblot法检测相关信号通路的蛋白表达水平。
3.结果
3.1OA-NO2抑制高糖诱导的HPMCsEMT
免疫荧光染色结果显示，高糖组中的HPMCs表达了间充质标志物Vimentin，而细胞上皮标志物E-cadherin表达较低。然而，在OA-NO2处理组中，Vimentin的表达水平较低，E-cadherin表达水平较高，表明OA-NO2能够抑制高糖诱导的HPMCsEMT。
3.2OA-NO2影响信号通路的调控
Westernblot结果显示，OA-NO2处理组中，高糖诱导的HPMCsPI3K/AKT、Wnt/β-catenin和TGF-β/Smad4信号通路的蛋白水平较低，说明OA-NO2可能通过调控这些信号通路来抑制EMT的发生。
4.讨论
本研究结果表明，OA-NO2可以有效抑制高糖诱导的HPMCsEMT。此外，OA-NO2可能通过抑制多个信号通路的活性来发挥其抗EMT作用。
5.结论
综上所述，本研究揭示了硝基油酸抑制高糖诱导的人腹膜间皮细胞上皮-间充质转化的作用。OA-NO2可能通过调控多个信号通路来发挥其抗EMT的作用。这些发现为进一步研究腹膜透析膜纤维化的机制以及开发相应的治疗策略提供了新的思路。
参考文献：
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