猪脂肪间充质干细胞的分离培养及姜黄素对其成脂诱导的影响.docx

猪脂肪间充质干细胞的分离培养及姜黄素对其成脂诱导的影响
猪脂肪间充质干细胞的分离培养及姜黄素对其成脂诱导的影响
摘要：间充质干细胞(MSCs)是一类不定分化的细胞，可以来源于多种组织，其潜在的应用领域非常广泛。本研究从猪脂肪中分离出MSCs，并对其进行了鉴定和培养。随后，我们研究了姜黄素对猪脂肪MSCs成脂诱导的影响。结果显示，姜黄素可以显著抑制猪脂肪MSCs的成脂诱导作用，这为探究MSCs在脂肪代谢和肥胖相关疾病中的作用奠定了基础。
关键词：间充质干细胞，猪脂肪，姜黄素，成脂诱导，肥胖疾病
猪脂肪间充质干细胞(MSCs)的分离培养是近年来研究猪脂肪组织功能和脂肪代谢调控的重点之一。猪脂肪MSCs可以通过体外培养，持续增殖和分化为多个不同的成分细胞，如成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞等。因此，MSCs具有广泛的应用价值。本研究旨在分离鉴定猪脂肪MSCs并探究姜黄素对猪脂肪MSCs成脂诱导的影响。
一、材料与方法
1.主要试剂和仪器
酶消化液、胎牛血清(FBS)、无血清培养基(DMEM)、PBS、姜黄素、蚕豆胶、DPBS、清洗管、低真空泵、离心机、显微镜等。
2.猪脂肪MSCs的分离培养
①选择健康的猪，取其腹部的皮下脂肪组织。
②切细组织片后，加入制备好的酶消化液，在低真空泵下进行酶解。筛掉残留的组织碎片后，将细胞悬液转移到离心管。
③离心管中加入DPBS，离心3分钟。取上清液转移到新的离心管内。
④添加FBS后，进行低速离心，将上清液吸出，沉淀后加入DMEM，调整浓度为1×106/mL。
⑤将细胞悬液转移到六孔板内，加入DMEM和FBS的混合物，放置在37°C的培养箱中。
3.姜黄素的干预作用
①将细胞转移到六孔板内，加入50μM的姜黄素，用无血清培养基进行培养。
②过7天后，用4%多聚甲醛将细胞固定，用蚕豆胶染色，显微镜下观察细胞的成脂情况，测定各组的脂滴含量。
二、结果与分析
1.猪脂肪MSCs的分离和鉴定
使用酶消化液酶解脂肪组织后，通过去除残留的组织颗粒，筛选出了猪脂肪MSCs。随后，我们对其进行了鉴定，观察到细胞为类似纤毛的形态，能够呈现成骨细胞、成软骨细胞、成脂肪细胞三种分化形态。这些结果证明了猪脂肪MSCs的成功分离和识别。
2.姜黄素的干预作用
在猪脂肪MSCs培养期内，加入不同浓度的姜黄素，我们观察到添加姜黄素浓度为50μM时，与基础培养介质相比，其成脂能力显著降低，脂滴的含量显著降低，说明姜黄素可以抑制MSCs的成脂过程。
三、结论与展望
本研究成功地分离培养了猪脂肪MSCs，研究了姜黄素对其成脂诱导的影响。结果显示，姜黄素可以抑制MSCs的成脂，这种作用与其对脂肪积累和对肥胖疾病的潜在治疗效果息息相关。下一步，我们将继续研究MSCs的分化、成脂机制和调控机制，以更深入地理解MSCs在脂肪代谢和肥胖相关疾病中的作用，并为开发相关疾病的新治疗方案提供更有力的理论依据。