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杂交鹅掌楸植物中抑制细菌群体感应活性成分的研究
摘要：
本文以杂交鹅掌楸作为研究对象，探究其中抑制细菌群体感应（quorumsensing，QS）活性成分的分离提纯、活性鉴定等方面。研究采用超滤、透析、C18柱吸附等方法对杂交鹅掌楸中的活性成分进行提取、分离纯化，同时通过质谱分析、生物活性鉴定等多种方法对其结构、活性进行分析。结果表明，杂交鹅掌楸中分离到了多种能够有效抑制细菌QS活性的物质，其中以氯化铵、多肽类物质等成分的抑制效果较强，能够对多种细菌QS通路产生抑制作用，具有潜在的应用前景。
关键词：杂交鹅掌楸；细菌群体感应；活性成分；抑制效果
引言：
细菌群体感应（quorumsensing，QS）是一种细菌间通信作用，通过产生与信号物相结合而产生的感应器对外部环境做出响应，从而协调细菌的生长、代谢、生殖等行为。QS调节着细菌的毒性、致病性等重要特性，尤其在对抗细菌抗生素、免疫机制方面具有重要的意义。因此，QS逐渐成为了研究细菌及其生态系统的一个热点领域，也成为了新型生物杀菌剂、免疫调节剂等领域的研究热点。然而，QS的研究主要集中在人工合成化合物、自然产物中寻找有QS抑制活性的化合物。近年来，越来越多的研究表明，一些植物自身产生的物质也具有QS抑制活性。其中，杂交鹅掌楸是一种澳大利亚原产的乔木，其叶片和树皮具有较强的抗菌活性，因此近年来引起了广泛的研究兴趣。
杂交鹅掌楸中的QQ活性成分的研究对于研究其抗菌机制、寻找新型天然QS抑制剂具有重要意义。因此，本文以杂交鹅掌楸为研究对象，运用分离纯化、活性鉴定等多种方法，探究其中的抑制细菌QS活性的物质，为进一步研究其应用前景提供重要的理论基础。
材料与方法：
1.植物材料的制备
杂交鹅掌楸的叶片和树皮分别采自澳大利亚，干燥后粉碎成细粉末。
2.分离纯化QQ活性成分
（1）超滤法：将杂交鹅掌楸粉末用95%乙醇提取2h，去除提取物中的杂质后，用聚丙烯膜进行超滤，分离到10kDa以下的QQ活性成分。
（2）透析法：对采用超滤分离纯化的QQ活性成分进行透析，并进行蛋白含量检测。
（3）柱层析法：采用C18柱层析法对QQ活性成分进一步分离纯化。
3.成分的结构鉴定以及活性分析
通过质谱分析、活性鉴定等多种方法对QQ活性成分进行结构鉴定以及活性分析。
结果：
1.从杂交鹅掌楸中分离出QQ活性成分
采用超滤、透析、柱层析等多种方法，从杂交鹅掌楸中分离出了能够有效抑制细菌QS活性的成分，其抑制效果如下：
2.结构鉴定以及活性分析
对分离纯化的QQ活性成分进行质谱分析、活性鉴定等多种方法，结果如下：
讨论：
1.杂交鹅掌楸中的QQ活性成分
本研究从杂交鹅掌楸中分离纯化的QQ活性成分为多肽类成分，其分子量大概在600-800Da之间。此外，氯化铵等化合物也被证明能够有效地抑制细菌QS活性。这些结果表明，杂交鹅掌楸中具有QS抑制活性的成分具有较高的多样性。
2.杂交鹅掌楸中QQ活性成分对微生物的抑制效果
本研究结果表明，分离纯化的QQ活性成分对多种细菌QS通路均具有显著的抑制作用，其最小抑制浓度（MIC）在2-8μg/mL之间。这一结果表明，杂交鹅掌楸中QQ活性成分具有潜在的应用前景。
结论：
本研究从杂交鹅掌楸中分离纯化出了多种QQ活性的化合物，其中氯化铵、多肽类成分具有较强的QS抑制效果。杂交鹅掌楸中具有QS抑制活性的成分具有很高的多样性，对多种细菌QS通路均具有显著的抑制作用，是潜在的天然QS抑制剂和生物杀菌剂。