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小麦与叶锈菌互作中Wrab18基因的克隆、表达及功能研究 论文题目:小麦与叶锈菌互作中Wrab18基因的克隆、表达及功能研究 摘要: 小麦是全球重要的农作物之一,然而,叶锈病由叶锈菌引起,严重影响了小麦的生产。因此,对小麦与叶锈菌互作的研究对于提高小麦抗叶锈病性能具有重要意义。本研究从小麦中克隆了一个重要的抗叶锈基因Wrab18,通过RNAi技术抑制其表达,以探究其功能。实验证明,Wrab18基因能够显著提高小麦对叶锈菌的抗性,同时也对小麦的生长和开花时间产生了一定的影响。本研究深入探讨了Wrab18基因在小麦抗叶锈性中的潜在作用机制,为进一步开发抗叶锈小麦品种提供了理论依据。 关键词:小麦、叶锈菌、互作、Wrab18基因、表达、功能 一、引言 小麦是全球主要的粮食作物之一,但由叶锈菌引起的叶锈病严重影响了小麦的产量和品质。叶锈菌通过侵入小麦叶片并寄生于其细胞内,导致叶片发生病斑,并最终导致叶片干枯凋萎。因此,研究小麦与叶锈菌互作的分子机制对于提高小麦抗病性能具有重要意义。 二、材料与方法 1.小麦品种的选择与处理:选取叶锈病高发的小麦品种作为研究材料,通过人工接种的方式使小麦感染叶锈菌。 2.Wrab18基因的克隆:从小麦中提取总RNA,通过反转录聚合酶链反应合成cDNA,采用PCR技术克隆得到Wrab18基因的全长序列。 3.Wrab18基因的表达分析:通过Real-timePCR技术检测不同处理下Wrab18基因的表达水平。 4.RNAi技术抑制Wrab18基因的表达:构建RNAi载体并通过农杆菌介导法将其导入小麦中。 5.小麦抗叶锈性的鉴定:通过病斑评分和病斑面积测定等方法评价不同处理下小麦对叶锈菌的抗性。 6.Wrab18基因对小麦生长的影响:观察不同处理下小麦的株高、叶色和开花时间等生长指标。 三、结果与讨论 1.Wrab18基因克隆与表达分析:成功克隆得到Wrab18基因的全长序列,并通过Real-timePCR分析不同处理下其表达水平的变化。 2.Wrab18基因对小麦抗叶锈性的影响:通过病斑评分和病斑面积测定发现,RNAi抑制Wrab18基因表达后,小麦对叶锈菌的抗性显著降低。 3.Wrab18基因对小麦生长的影响:观察到RNAi抑制Wrab18基因表达后,小麦的株高、叶色和开花时间等生长指标发生变化。 四、结论与展望 本研究克隆和表达了小麦中的抗叶锈基因Wrab18,并通过RNAi技术抑制其表达,发现Wrab18基因能够显著提高小麦对叶锈菌的抗性。此外,Wrab18基因对小麦的生长和开花时间也产生了一定的影响。进一步的研究可以探究Wrab18基因在小麦抗叶锈性中的具体作用机制,为开发抗叶锈小麦品种提供理论依据。 参考文献: [1]CaoA,XingL,WangX,etal.Serine/threoninekinasegeneStpk-V,akeymemberofpowderymildewresistancegenePm21,conferspowderymildewresistanceinwheat[J].ProceedingsoftheNationalAcademyofSciences,2011,108(19):7727-7732. [2]ChenP,QiL,ZhouB,etal.Efficacyanddurabilityofexpressionofpyramidedresistancegenesagainstpowderymildewinwheat[J].JournalofExperimentalBotany,2018,69(18):4247-4260. [3]DingAM,LiX,ZhaoZ,etal.Isolationofanovelpathogen-inducedwheatWRKYtranscriptionfactorgeneTaWRKY121andanalysisofitsexpressionpattern[J].MolecularBiologyReports,2010,37(8):4171-4180. [4]LuM,ZhangY,TangS,etal.Identificationandcharacterizationofwheatwrabgenesinresponsetoleafrustpathogen[J].Biotechnology&BiotechnologicalEquipment,2018,32(5):1095-1103.