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慢病毒载体介导siRNA沉默NGR基因促进脊髓损伤后轴突再生的实验研究
慢病毒载体介导siRNA沉默NGR基因促进脊髓损伤后轴突再生的实验研究
摘要：随着人群结构的变化和生活方式的不断改变，慢性疾病越来越成为诸多疾病严重危害人类健康和社会发展的重要因素之一。尤其是一些神经系统疾病，如脊髓损伤，给患者带来了极大的身心痛苦，难以治愈。因此，寻找新的治疗方式成为当前研究的火热议题。本文研究了利用慢病毒载体介导siRNA沉默NGR基因，对脊髓损伤后轴突再生的影响，发现NGR的沉默可以促进脊髓损伤后轴突再生，从而为脊髓损伤的治疗提供了新的方向和方法。
关键词：慢病毒载体；siRNA；NGR基因；脊髓损伤；轴突再生
1.研究背景
脊髓是人体神经系统中的重要一部分，它连接了大脑和身体的各个部分，是神经信息传递的主要通道。脊髓受损后轴突再生能力较差，使得瘫痪问题得不到有效的治疗。传统的治疗方法主要包括手术、物理疗法和药物，但其有疗效有限，效果不尽如人意。
NGR基因是一种新生的基因，它表达在髓鞘的不同部位，已经被证明可以抑制神经再生和轴突再生，阻碍脊髓的修复。因此，如何有效地沉默NGR基因成为脊髓损伤后研究的焦点问题之一。
2.实验方法
本实验采用了慢病毒载体（LV）介导siRNA沉默NGR基因的方法，研究了该方法对脊髓损伤后轴突再生的影响。
2.1制备慢病毒载体
首先，将包含目标序列的siRNA插入载体pLKO.1中，构建siRNA慢病毒载体LV-siRNA/NGR。接着，将LV-siRNA/NGR包装到慢病毒颗粒中，制备慢病毒载体。
2.2动物实验
本实验使用BassoMouseScale（BMS）评分方式评价了实验组和对照组小鼠在受伤后的运动能力，并记录了脊髓横切面组织及分子改变。实验组小鼠接受了LV-siRNA/NGR治疗，对照组小鼠则接受了其他治疗或未接受治疗。
2.3分子生物学实验
将脊髓损伤后的轴突标本离体，进行分子生物学实验。采用RealtimePCR和Westernblot分别检测NGR基因的表达和蛋白减少量。
3.实验结果
本研究结果表明，LV-siRNA/NGR对NGR基因的沉默效果良好，NGR基因的表达水平和蛋白质水平均显著下降。而实验组小鼠的BMS评分比对照组更高，表示实验组小鼠的运动恢复速度更快。轴突标本的分子生物学实验结果也表明，轴突再生得到促进，伴随着NGR基因表达的下降。
4.结论
本研究结果表明，LV-siRNA/NGR可以有效沉默NGR基因，促进脊髓损伤后的轴突再生，并改善小鼠的运动恢复速度。因此，NGR基因的沉默提供了一种新的治疗方法来治疗脊髓损伤以及其他神经系统疾病，可望为相关治疗提供新思路与进展。
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