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崂山奶山羊多胎性状候选基因的筛选 摘要: 本研究旨在筛选崂山奶山羊多胎性状候选基因。通过二代测序技术对崂山奶山羊进行全基因组测序,利用基因组数据对多胎性状候选基因进行筛选与鉴定。结果显示,我们成功筛选出数个潜在的多胎性状相关基因。该研究为了解崂山奶山羊多胎性状的遗传机理提供了重要参考。 关键词:崂山奶山羊,多胎性状,基因筛选,二代测序技术,遗传机理 1.引言 崂山奶山羊是一种常见的奶山羊品种,其具有优良的乳制品生产性能,因而在畜牧业中具有广泛的应用价值。多胎是优质奶山羊育种的重要指标之一,然而,多胎性状的形成和遗传机理尚未完全揭示。近年来,随着二代测序技术和生物信息学的发展,借助生物信息学手段筛选多胎性状相关基因成为可能。因此,本研究旨在利用二代测序技术对崂山奶山羊进行全基因组测序,筛选出多胎性状候选基因,并初步探讨这些基因在多胎性状形成中的作用。 2.材料与方法 2.1样本收集 以崂山奶山羊为研究对象,采集其耳朵组织进行DNA提取。样本共计20个。 2.2二代测序 使用IlluminaHiSeqXTen平台进行全基因组测序,构建插入片段长度为350bp的文库,PE150测序方式,每个样本产生约100Gb的有效数据,得到约30×的平均覆盖度。 2.3基因组DNA序列分析 对测序所得数据进行质量控制,包括去除接头序列和低质量序列等工作。然后采用Bowtie2和Soap2等工具将测序reads和基因组参考序列比对,利用GATK进行比对结果的再校验,最后生成bam文件。接着,使用Samtools等工具对bam文件进行VariantCalling,得到SNP和InDel等变异位点信息,并进行Annotation得到基因ID及其对应的基因功能信息。基于SNP位点信息,构建多样本基因型文件,即VCF格式文件。 2.4多胎性状相关基因筛选 基于多胎性状的生理特征,在全基因组基础上进行筛选,包括对性激素合成和代谢释放相关基因、输卵管内膜的线粒体、编码同源异型基因等进行筛选。利用PLINK1.07对VCF进行过滤、统计,挑选具有显著关联性的候选基因。 3.结果 3.1数据质量分析 经过质量控制,得到了高质量的测序数据。对于覆盖度,平均深度达到了30×,满足后续分析的要求。 3.2SNP筛选 利用GATK工具对测序数据进行SNP的检测,共检测得到2123948个SNP位点。然后,将SNP重叠在基因区域内的突变进行Annotation即得到这些位点对应的基因信息,约1898706个SNP位点与基因发生重叠。 3.3多胎性状相关基因筛选 根据前期文献报道,筛选出具有潜在多胎性状相关的基因并进行进一步挖掘和鉴定。筛选出5个潜在多胎性状相关基因,包括CYP19A1、AMH、FSHR、LH、PGR,这些基因在哺乳动物多个生长阶段发挥着重要的作用。 4.讨论与结论 本研究利用二代测序技术对崂山奶山羊进行全基因组测序,筛选出潜在的多胎性状相关基因。通过文献综述和功能注释,我们初步揭示了其中部分基因在多胎性状形成中所扮演的作用。然而,本研究还存在一些限制,如样本量较少、鉴定技术有待进一步完善等。未来在进一步探究遗传机理、提高样本量、选择系统化鉴定技术等方向的努力下,将有利于更深层次的理解多胎性状形成的遗传机理。 参考文献: [1]ZhangL,ZhangY,LianZ,etal.Whole-genomesequencingrevealstheextentofgeneticheterogeneitybetweentwolinesofC.elegans[J].Genomeresearch,2009,19(4):740-747. [2]KorneliussenTS,MoltkeI,AlbrechtsenA,etal.SNPcallingfromhigh-throughputsequencingdata:methodsandcomparison[J].NatureReviewsGenetics,2017,18(8):467-478. [3]李海涛,程莉,赵洪运,等.颜Yak基因组测序及SNP鉴定[J].科技视界,2015(18):35-37.