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富硒酵母生产工艺优化及酵母多糖抗PCV2作用的研究 摘要:本文主要针对富硒酵母的生产工艺进行了优化研究,并探讨了富硒酵母多糖对猪圆环病毒2号(PCV2)的抗病作用。研究结果表明,通过优化生产条件,可以在富硒培养基中获得高产率的富硒酵母,并且该富硒酵母多糖具有一定的抗PCV2的生物活性,为开发新型的病毒治疗剂提供了新的思路。 关键词:富硒酵母;生产工艺优化;多糖;抗病作用;PCV2 1、概述 猪圆环病毒2号(Porcinecircovirus2,PCV2)是一种严重危害猪类健康的病毒,主要引起猪难治性消耗性疾病(Porcinemultisystemicwastingsyndrome,PMWS),导致猪群中的死亡率升高和生产效益下降。目前,针对该病毒的治疗手段仍然非常有限,因此寻找对抗PCV2的有效治疗方法显得尤为必要。 富硒酵母是一种富含硒元素的酵母菌,具有多种生物活性,如抗炎、抗氧化、免疫调节等作用,被广泛应用于营养保健、抗肿瘤、减缓衰老等领域。与此同时,富硒酵母中富含的多糖分子也是具有生物活性的重要成分,具有抗菌、抗病毒、免疫增强等多种作用。 本文旨在通过优化富硒酵母的生产工艺,探索其多糖分子对PCV2的抗病作用,为探索新型病毒治疗剂提供科学依据。 2、材料与方法 2.1、实验材料 富硒酵母菌株、硒酸钠、酵母粉、葡萄糖、玉米粉、酵母抽提物、洛阳土等。 2.2、培养条件与生产工艺优化 首先,通过试验优化酵母菌株的培养条件,包括酵母量、初步培养时间、培养基组成等,以获得高效的酵母生长。 然后,在基础培养基的基础上,添加不同浓度的硒酸钠和酵母抽提物,调整培养条件进一步优化富硒酵母的生产工艺,并通过营养学测定和硒测定等方法对相应的富硒酵母培养液进行分析。 2.3、提取多糖并测定其抗PCV2活性 采用热水提取法提取富硒酵母多糖,并通过紫外分光光度计和高效液相色谱将其进行分离和纯化。 同时,采用细胞培养技术构建PCV2感染模型,并在加入不同浓度的富硒酵母多糖后观察PCV2的复制率和细胞的增殖情况。最后,通过MTS法和PCR技术对PCV2的生长和富硒酵母多糖的抗病毒效果进行测定。 3、结果与分析 3.1、生产工艺优化 经过优化,确定酵母数量为3×10^7CFU/mL,初步培养时间为12h,培养基由葡萄糖、玉米粉、洛阳土组成,百分比分别为1.5%、2.5%、1.5%,在添加0.5mg/L硒酸钠和6mg/L酵母抽提物的情况下,可得到富硒酵母。 营养学测定和硒测定结果表明,富硒酵母的产率较高,平均在15.5μg/g左右,且生长速度较快,适合工业生产。 3.2、多糖的抗PCV2作用 经过多次试验,发现富硒酵母多糖对PCV2的抗病效果取决于其浓度。当多糖浓度达到100μg/mL时,PCV2的复制率明显下降,细胞的增殖情况得到了改善。MTS法和PCR技术的测定结果也证实了多糖的抗病毒效果。 4、结论 通过本次研究,我们成功地优化了富硒酵母的生产工艺,并发现其中所含的多糖对抗PCV2具有一定的生物活性。这为开发新型病毒治疗剂提供了新的思路,并在一定程度上拓宽了富硒酵母的应用领域。 参考文献 [1]徐海鹏,郭华新.富硒酵母及其在水产养殖中的应用[J].水产科技,2020,22(12):92-93. [2]LiuX,etal.OptimizationofcultureconditionsforSe-enrichedSaccharomycescerevisiaeinbatchfermentationforenhancedbioactivity.FoodScience&Nutrition,2020,8(12):6601-6614. [3]LiS,etal.BiologicalactivityofpolysaccharidesfromSaccharomycescerevisiae:recentadvancesandapplications.JournalofAgricultural&FoodChemistry,2020,68(49):14382-14394.