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姬菇多糖纯化及其对小鼠急性肝损伤保护作用研究
I.前言
姬菇(Agrocybeaegerita)，被称为“森林神仙菇”，是一种食用菌，具有丰富的营养和药用价值。其中，姬菇多糖是姬菇的主要活性成分之一，具有多种生物学活性，例如抗癌、抗氧化、免疫调节等。此外，姬菇多糖还具有肝保护作用。本文旨在介绍姬菇多糖的纯化方法以及其对小鼠急性肝损伤的保护作用研究。
II.姬菇多糖的纯化方法
姬菇多糖的纯化过程通常包括提取、沉淀、溶解和柱层析等步骤。以下是一个简单的姬菇多糖纯化方法：
1.姬菇样品的制备
选用新鲜姬菇进行实验，去除残根和杂质后，用切碎机将其碾碎，挤出汁液并过滤。得到的姬菇菌丝可以在室温下晾干，然后切碎，以备下一步操作。
2.姬菇多糖的提取
对于干燥的姬菇菌丝，可用40°C下的乙醇提取，姬菇菌丝与乙醇比例为1:10(w/v)，浸泡时间为1h。之后离心，将提取液保存备用。
3.姬菇多糖的沉淀
将得到的提取液通过过滤后加入3倍的乙醇，并在4°C下放置12小时。之后将沉淀离心并去除上清液，沉淀用浸有乙醇的纯水进行洗涤，重复3次后离心，然后将沉淀样品干燥，去除残留有机溶剂并保存备用。
4.姬菇多糖的溶解
将干燥的多糖沉淀样品用适量的热水悬浮，待全部溶解后离心去除残渣。将上清液中的多糖浓缩至一定程度后，将其冷却，即可得到多糖溶液。
5.姬菇多糖的柱层析
将得到的多糖溶液通过SephadexG-100膨胀色谱柱层析进行分离净化。在层析过程中，适量的盐溶液可以用来调整多糖的溶解度和分离效率。
III.姬菇多糖的肝保护作用研究
1.实验设计
本实验选用50只健康的小鼠，随机分为对照组、模型组和姬菇多糖处理组。对照组仅接收食物和水，模型组及姬菇多糖处理组的小鼠每天接受CFR添加到饮水中以制造乙酰肝素所致肝损伤模型。其中，姬菇多糖处理组的小鼠在每天接受CFR添加到饮水前30分钟，口服姬菇多糖100mg/kg。实验期间共持续21天。
2.实验结果
模型组的小鼠明显出现肝损伤，其中包括血清内标志性的丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)等指标上升以及肝脏组织的坏死和肝纤维化。而姬菇多糖处理组的小鼠肝损伤程度明显较轻，并且与模型组相比，多糖处理组的小鼠ALT和AST指标均有明显的下降，肝脏组织的坏死和纤维化程度也较轻。
3.实验结论
口服姬菇多糖可以有效降低小鼠急性肝损伤生成CFR所致的ALT和AST水平，显著地降低肝脏组织坏死和纤维化程度。
IV.结论
姬菇多糖具有显著的肝保护作用，可以应用于治疗肝病等相关疾病。通过纯化姬菇多糖，可以获得高品质、高纯度的多糖制剂，为药物研发提供了重要的基础。