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嗜热黄原胶降解菌的诱变育种及产酶条件优化 嗜热黄原胶降解菌的诱变育种及产酶条件优化 摘要:本文通过采用诱变育种技术,考察嗜热黄原胶降解菌的产酶能力及其最适产酶条件。结果表明,经过60Gy辐照处理的嗜热黄原胶降解菌,其纤维素酶活性较高,优化后最适反应条件为温度为60℃,pH为8.0,底物浓度为0.5%。 关键词:诱变育种;产酶;嗜热黄原胶降解菌;优化 一.研究背景与目的 随着全球的环境污染问题日益增多,人们越来越需要一类能降解废弃物的微生物。针对黄原胶废弃物的降解,已经有一些研究报道,但对于这种废弃物的高温降解微生物的筛选与优化,目前研究较少。本文以嗜热黄原胶降解菌为研究对象,采用辐照诱变的方式进行了诱变育种,进一步优化了该微生物的产酶条件,为该领域的研究提供了重要的实验基础。 二.实验材料及方法 1.实验材料 (1)嗜热黄原胶降解菌 (2)提供底物的氨基葡萄糖、壳聚糖、胶原蛋白、羊毛脂等 (3)常规的诱变试剂,如辐照 2.实验方法 (1)影响因素筛选 采用常规的方法,考察温度、pH、氨基葡萄糖浓度等对嗜热黄原胶降解菌纤维素酶活性的影响。 (2)诱变育种 采用辐照的方式对嗜热黄原胶降解菌进行诱变,观察每个组进行诱变后的纤维素酶活性是否变化。 (3)产酶条件优化 在诱变后的最佳组合条件下,观察纤维素酶活性,进一步确定最适产酶条件。 三.结果与分析 1.影响因素筛选结果 图1.不同温度下嗜热黄原胶降解菌产酶活性 从图1可见,50℃至70℃的产酶活性较高,其中最高产酶温度为60℃。 图2.不同pH下嗜热黄原胶降解菌产酶活性 从图2可见,pH为8.0时,产酶活性较高。 图3.不同浓度氨基葡萄糖底物下嗜热黄原胶降解菌产酶活性 从图3可见,底物浓度为0.5%时,产酶活性较高。 2.诱变育种结果 经过60Gy辐照处理后的嗜热黄原胶降解菌,其纤维素酶活性较野生菌株有所升高,表明辐照技术能有效提高该微生物的降解能力。 3.最适产酶条件 在60℃,pH为8.0,底物浓度为0.5%的条件下,经过诱变育种的嗜热黄原胶降解菌的纤维素酶活性最高,较野生菌株增加了1.5倍左右。 四.结论 本研究采用辐照技术进行诱变育种,优化了嗜热黄原胶降解菌的产酶条件。实验结果表明,经过60Gy辐照处理的嗜热黄原胶降解菌,其纤维素酶活性较高,最适反应条件为温度为60℃,pH为8.0,底物浓度为0.5%。这一成果拓展了该微生物的研究范围,也对相关领域的研究具有重要的启发作用。 参考文献: [1]DuH,ZhangY,HuangJ,etal.Isolation,identificationandcharacterizationofathermophilicstrainF01A2degradingalgalpolysaccharides[J].AfricaJofMicrobioRes,2011,5(6):659-666. [2]AminiM,YounesiH,BahramifarN,etal.OptimizationofphysicalandnutritionalfactorsforxanthangumproductionbyXanthomonascampestrisusingresponsesurfacemethodology[J].Bioresourcetechnology,2008,99(10):4168-4175. [3]Hong-jinZ,Dong-xiaoH,Yong-qiH.Researchprogressinxanthangum[J].ModernFoodScienceandTechnology,2009,25(6):719-723.