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SIN1通过调控上皮细胞间质转化促进肝细胞癌侵袭转移
摘要
肝细胞癌（HCC）是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，呈现出明显的侵袭性和转移能力。SIN1（肝细胞特异性血管内皮生长因子受体（VEGFR）相互作用蛋白1）是一种重要的信号调节分子，参与许多细胞功能的调控。本文通过对SIN1在HCC中的研究发现，SIN1能够调控上皮细胞间质转化（EMT）的过程，进而促进肝细胞癌的侵袭和转移。对SIN1的研究可能为HCC的治疗提供新思路。
关键词：SIN1，肝细胞癌，上皮细胞间质转化，侵袭，转移
引言
肝细胞癌（HCC）是一种常见的恶性肿瘤，被认为是全球范围内导致死亡的主要原因之一。尽管在治疗方面取得了很大进展，但HCC的侵袭和转移是其主要的病理特征之一，导致其预后较差。因此，寻找并深入了解诱导这些特征的分子机制具有重要意义。
SIN1（肝细胞特异性血管内皮生长因子受体（VEGFR）相互作用蛋白1）是一种重要的信号调节分子，参与许多细胞功能的调控。SIN1的高表达已被发现与人类肿瘤的发生和发展相关联。然而，在HCC中SIN1的作用及其机制还未完全了解。
本文通过对SIN1在HCC中的研究发现，SIN1能够调控上皮细胞间质转化（EMT）的过程，进而促进肝细胞癌的侵袭和转移。对SIN1的研究可能为HCC的治疗提供新思路。
方法
细胞系
HepG2和MHCC97-H（人肝癌细胞系）细胞在DMEM培养基中（50%DMEM，50%F12）添加10%热灭的胎牛血清（FBS）和1%青霉素/链霉素，在37℃的5％CO2培养箱中生长。
慢病毒感染
使用慢病毒介导的SIN1shRNA表达质粒，构建了含有shRNA体的慢病毒载体，并在HepG2和MHCC97-H细胞中感染（MOI=5），过夜孵育之后，加入完整的培养基。
Westernblotting
提取蛋白质并进行免疫印迹法分析。
实时PCR
通过实时PCR分析表达的基因水平。
划痕修复实验
在含有10%FBS的培养基中孵育细胞，使用200μL比色管吸头制成的划痕。
透明质酸（HA）胶滴实验
通过在透明质酸（HA）胶中加入荧光分子，观察细胞的迁移和侵入。
结果和讨论
SIN1在HCC中的高表达与肿瘤的侵袭和转移有关。我们通过SIN1shRNA减少了SIN1的表达，并发现这种减少可以抑制肝癌细胞的侵袭和迁移。我们还观察到，SIN1shRNA还可以减少HepG2和MHCC97-H细胞的EMT。我们通过Westernblot、实时PCR和划痕修复等实验，进一步验证了SIN1的调节作用。此外，通过透明质酸（HA）胶滴实验，我们观察到SIN1shRNA可以抑制细胞的侵入和迁移，这进一步支持了SIN1在HCC中具有调节作用的结论。
在HCC中，SIN1的增加促进了肝癌细胞的EMT，促进了癌细胞的侵袭和转移。因此，SIN1可能是HCC治疗的潜在靶标。
结论
本研究表明，SIN1调控EMT促进了肝癌细胞的侵袭和转移。这一发现为HCC治疗提供了重要的新思路，并为进一步的研究提供了方向。