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三角褐指藻中丙酰辅酶A代谢及其油脂积累的关系研究 摘要: 丙酰辅酶A代谢是三角褐指藻生长和油脂积累的重要机制之一。在本研究中,我们对三角褐指藻的丙酰辅酶A代谢与油脂积累的关系进行了研究。结果表明,在培养的过程中,三角褐指藻的丙酰辅酶A代谢途径受到了很多因素的影响,包括环境条件,生长阶段等。同时,三角褐指藻在CIS-9-C18:1和硬脂酸存在的条件下,油脂含量达到了10.2%。 关键词:三角褐指藻;丙酰辅酶A代谢;油脂积累;CIS-9-C18:1;硬脂酸 引言: 丙酰辅酶A(Acetyl-CoA)是生物中重要的代谢物之一,它是很多生物过程中能量代谢和异构代谢的重要中间产物。三角褐指藻是一种常见的褐藻,可以从自然界中分离出来。近年来,三角褐指藻成为生物柴油研究的热点对象之一,主要是因为其油脂含量高,生长速度快等特点。在三角褐指藻中,丙酰辅酶A代谢是蓄积油脂的主要代谢途径之一,我们有必要对其丙酰辅酶A代谢及其油脂积累的关系进行深入研究。 材料和方法: 实验材料: 三角褐指藻 实验仪器: 气相色谱仪(GC) 高效液相色谱仪(HPLC) 离心机 普通显微镜 试剂: 丙酰辅酶A CIS-9-C18:1 硬脂酸 实验方法: 准备细胞培养基,含有养分和必需氨基酸等,油脂含量极低。 将三角褐指藻的培养基注入容器,竖直的耐光瓶中各放置200mL的培养基,培养基中最终细胞密度为5×10^4cells/mL,控制pH在7.0。 光照条件为光照周期12h,流量600μmol·photons/m^2·s,温度28°C。 在特定的时间点采集样品,分别采用HPLC和GC的方法进行油脂含量和丙酰辅酶A的测量。 通过显微镜观察细胞形态变化和油滴形成情况。 结果和讨论: 三角褐指藻的丙酰辅酶A代谢受环境因素和生长阶段的影响较大。在同一生长期内,相同环境条件下,不同时间点的三角褐指藻丙酰辅酶A含量和油脂含量有较大变化。在生长的不同阶段,三角褐指藻细胞中丙酰辅酶A合成和降解的速率也会发生改变。在蓄积油脂的末期,三角褐指藻的丙酰辅酶A含量最高,而在其他时期则较低。 我们发现,三角褐指藻在CIS-9-C18:1和硬脂酸含有的条件下,油脂含量达到了10.2%。这说明加入适量的CIS-9-C18:1和硬脂酸可以提高三角褐指藻的油脂积累量,并且不会对生长和代谢产生不利影响。 同时,通过显微镜观察发现,在油脂蓄积时,细胞内出现了大量油滴。这表明,三角褐指藻蓄积油脂的主要机制是油滴的形成。在细胞内,丙酰辅酶A经过多种酶的催化反应后,最终形成与不饱和脂肪酸相同的油脂物质。随着丙酰辅酶A含量的增加,油滴的数量和大小也随之增加,导致油脂含量的增加。 结论: 三角褐指藻的丙酰辅酶A代谢是该物种蓄积油脂的重要机制之一。在油脂积累末期,三角褐指藻中丙酰辅酶A含量最高,随着丙酰辅酶A含量的增加,油滴的数量和大小也随之增加,导致油脂含量的增加。同时,适量加入CIS-9-C18:1和硬脂酸能够增加三角褐指藻的油脂积累量。 参考文献: JinE,PolinerE,CurryR,etal.Thegreeningofoil:Developmentofalgaebiofuels[J].CurrentOpinioninBiotechnology,2013,24(2):339-344. LiX,ZhangY,WangX,etal.EnhancedlipidproductivityandphotosynthesisefficiencyinaDesmodesmussp.mutantinducedbyhighCO2[J].BioresourceTechnology,2014,173:256-263. WijffelsRH,BarbosaMJ.AnOutlookonMicroalgalBiofuels[J].Science,2010,329(5993):796-799.