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NGF对小鼠骨髓诱导的树突状细胞成熟分化及功能的影响
摘要：
神经生长因子（NGF）是神经系统中重要的信号分子，不仅在神经细胞的生长分化中起重要作用，而且在细胞免疫的调节过程中也发挥重要作用。本文以小鼠骨髓为研究对象，探讨了NGF对小鼠骨髓树突状细胞成熟分化及功能的影响。结果表明，NGF能够促进小鼠骨髓树突状细胞的成熟分化，增强其对外周血单核细胞的识别和激活能力，并且在细胞免疫应答中发挥重要作用。这些结果有望为深入研究NGF在细胞免疫调节机制中的作用提供新的思路和依据。
关键词：神经生长因子，小鼠骨髓，树突状细胞，成熟分化，外周血单核细胞，细胞免疫
一、引言
树突状细胞（DC）是免疫系统中的专业抗原提呈细胞，具有识别、摄取、处理和展示抗原的能力，是免疫系统中的重要组成部分。DC在免疫应答中发挥关键作用，包括识别和激活T细胞、促进B细胞抗体产生、引导自身的免疫应答等。研究表明，DC的数量、质量和功能与各种疾病的发生和发展密切相关。
神经生长因子（NGF）是神经系统中的一种小分子信号分子，参与神经细胞的生长、分化和发育，是神经系统和细胞免疫系统之间的桥梁。研究表明，NGF还参与细胞免疫调节过程，参与DC的分化、成熟和功能的调节，但其具体的作用机制尚不完全明确。因此，本文以小鼠骨髓为研究对象，探讨NGF对小鼠骨髓DC的成熟分化及其功能的影响，探寻NGF在细胞免疫调节中的作用机制。
二、材料与方法
2.1实验动物
雄性C57BL/6小鼠，6～8周龄，体质量20～25g，由北京大学动物实验中心供应，饲养在无菌环境下，自由进食和饮水。
2.2物质试剂
NGF（50ng/ml）和GM-CSF（10ng/ml）（eBioscience，美国）、IL-4（10ng/ml）、LPS（100ng/ml）（Sigma，美国）。
2.3细胞质检测
流式细胞仪、原位细胞杂交试剂盒、RNA提取试剂盒。
2.4细胞分离、培养和诱导
小鼠骨髓细胞通过骨髓移植和骨髓细胞接种培养得到。骨髓细胞通过红细胞淋巴细胞分离液（Lympholyte-M，Cedarlane，加拿大）分离，以CD11c微磁珠（MiltenyiBiotec，德国）分选得到CD11c+DC。CD11c+DC经不同浓度NGF预处理，并在GM-CSF和IL-4的诱导下培养7天，分别被LPS刺激24h，采用流式细胞仪检测表面分子CD80、CD86、MHC-II、CD40的表达水平并通过原位细胞杂交检测TNF-α、IL-6、IL-10和IL-12的mRNA表达水平。
三、结果
3.1NGF促进小鼠骨髓DC的成熟分化
通过观察CD11c+细胞在不同NGF浓度下的形态学变化和细胞表面标志物的表达，我们发现，NGF在50ng/ml下对小鼠骨髓DC的成熟分化有显著促进作用。在NGF诱导下，CD11c+细胞形态出现明显变化，膨胀并增生，表面CD80、CD86、MHC-II、CD40等三个共刺激分子的表达水平均显著上调（P<0.05）。
3.2NGF增强小鼠骨髓DC对外周血单核细胞的识别和激活能力
在外周血单核细胞刺激实验中，我们发现，NGF预处理后的小鼠骨髓DC对外周血单核细胞的识别和激活能力明显增强，其表面CD80、CD86、MHC-II、CD40等共刺激分子的表达水平均显著上调（P<0.05），并且能够有效地促进外周血单核细胞分化和活化。
3.3NGF在小鼠骨髓DC的免疫调节中发挥重要作用
在LPS诱导下，我们发现，NGF预处理后的小鼠骨髓DC表面共刺激分子水平和细胞因子酶基因表达水平均显著上调（P<0.05），且对巨噬细胞的免疫应答有明显促进作用。同时，对巨噬细胞的细胞因子和化学介质产生和表达也有显著影响。
四、讨论
本研究结果表明，NGF能够促进小鼠骨髓DC的成熟分化，增强其对外周血单核细胞的识别和激活能力，并在细胞免疫应答中发挥重要作用。这些结果进一步揭示了NGF在细胞免疫调节机制中的作用。研究表明，NGF能够促进DC的成熟分化，增强其对外周单核细胞的激活和识别能力，并且对巨噬细胞的免疫应答产生明显的影响。
这些结果对于深入研究NGF在调节免疫细胞功能和自身免疫疾病发生机制中的作用具有重要意义，有望为探索免疫调节的新靶标和新治疗方式提供新的思路和依据。但需要注意的是，本研究仅在小鼠模型下进行，难以直接推广到人类。因此，需要进一步进行临床研究来证实其作用机制和临床应用价值。
五、结论
NGF能够促进小鼠骨髓DC的成熟分化、增强其对外周血单核细胞的识别和激活能力、并在细胞免疫应答中发挥重要作用。这些结果揭示了NGF在调节免疫细胞功能和自身免疫疾病发生机制中的作用，对于探索免疫调节的新靶标和新治疗方式具有重要意义。