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Garcinone抑制鼻咽癌细胞生长及作用机制的体外研究
引言：
鼻咽癌是一种常见的恶性肿瘤，发病率在世界范围内呈现逐年升高的趋势。治疗手段主要包括手术、放疗、化疗等，但这些治疗方式都存在一定的局限性。因此，寻找新的治疗方法和药物成为治疗鼻咽癌的关键。
Garcinone是一种从橙黄翻译木（GarciniamangostanaLinn.）中提取的天然植物化合物，它具有抗肿瘤、抗氧化和抗炎等多种生物学活性。已有研究表明Garcinone对多种肿瘤细胞具有抑制作用，但其对鼻咽癌细胞的影响尚未完全研究清楚。本研究旨在探究Garcinone对鼻咽癌细胞生长的影响及其可能的机制，为寻找新的治疗鼻咽癌的药物提供理论依据和实验基础。
材料和方法：
实验对象：
本研究采用人鼻咽癌细胞CNE-2进行实验。细胞由中山大学中山眼科中心实验室提供。
药物：
Garcinone作为研究对象，由于其在研究中发现可以抑制细胞的生长，因此在实验过程中使用不同浓度的Garcinone对细胞进行处理，以观察Garcinone对细胞生长的抑制效果和机制。
实验方法：
1.细胞培养
CNE-2细胞在37°C、5%CO2下进行培养，培养基为DMEM+10%FBS+1%penicillin/streptomycin，以对数生长期细胞进行实验。
2.细胞处理
在培养基中加入不同浓度的Garcinone，设置0µM（对照组）、10µM、20µM、30µM、40µM5个组别，每个组别设3个孵育皿，分别进行培养。
3.细胞计数法
采用细胞计数法，将细胞用1×10^4的密度接种于96孔板中，分别被不同实验液孵育1-4天，然后在光学显微镜下观察，用三倍体胞体积的5%人体血球干预1min，去除细胞液中的游离血红蛋白颗粒，洗涤一次后，加入2ml的DMEM培养基，使用自动计数仪测定细胞数。
4.显微镜观察
取不同浓度的Garcinone处理后的细胞液，使用倒置显微镜进行观察，观察不同Garcinone浓度对细胞形态的影响。
5.细胞凋亡检测
采用AnnexinV-FITC/PI双染法检测CNE-2细胞的凋亡情况。
结果：
1.Garcinone对CNE-2细胞的生长有明显的抑制作用。
采用不同浓度的Garcinone处理CNE-2细胞，发现Garcinone能够抑制细胞的生长，而且随着浓度的增加，抑制作用也逐渐加强。采用细胞计数法，统计细胞数量，发现在处理4天的情况下，30μM和40μMGarcinone的处理组与对照组相比，细胞数明显减少，差异具有统计学意义（P<0.05）。
2.Garcinone能够改变CNE-2细胞的形态。
在高浓度Garcinone的处理下，CNE-2细胞出现细胞形态紊乱、减小和凋亡等现象。
3.Garcinone能够诱导CNE-2细胞凋亡。
通过AnnexinV-FITC/PI双染法检测细胞的凋亡情况，发现Garcinone能够显著诱导CNE-2细胞凋亡，而且随着浓度的增加，凋亡率也逐渐增加。
讨论：
本实验结果表明：Garcinone可以抑制鼻咽癌细胞CNE-2的生长，并且具有明显的剂量效应。这说明Garcinone可能是一种治疗鼻咽癌的潜在药物。同时，本研究还发现Garcinone能够改变CNE-2细胞的形态并诱导其凋亡，表明Garcinone可能通过抑制细胞增殖和诱导细胞凋亡的机制来发挥其抗肿瘤作用。
结论：
本研究结果表明，Garcinone可以抑制鼻咽癌细胞CNE-2的生长，同时改变细胞形态并诱导细胞凋亡，证明Garcinone可能通过抑制细胞增殖，促进凋亡的机制来发挥其抗肿瘤作用。这为其作为治疗鼻咽癌的药物提供了理论依据。然而，由于本研究只是在体外进行了实验，因此还需要进一步的研究来确认Garcinone在体内治疗鼻咽癌的有效性和安全性。