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油茶粕蛋白质提取工艺的研究 摘要 本文对油茶粕蛋白质的提取工艺进行研究,采用了物理法和化学法相结合的方法,通过对油茶粕蛋白质的提取、纯化及分析,初步确定了最佳的油茶粕蛋白质提取工艺。结果表明,在PH值为9时,超声波处理时间为30分钟,酶解时间为8小时的条件下,油茶粕蛋白质的提取率最高,并获得了较高的蛋白质含量和纯度。本研究对于油茶粕资源综合利用,促进了食品工业的可持续发展具有一定的意义和价值。 关键词:油茶粕;蛋白质提取;超声波处理;酶解;纯化 引言 油茶是我国油料和林果资源的重要品种之一,其籽粕具有高蛋白、高纤维、低脂肪等优良特点。近年来,随着食品行业的发展,以油茶籽粕为原料制造高蛋白食品的利润也逐渐增加。 但是,油茶籽粕蛋白质的提取效率却受到了很大的限制,主要原因是油茶籽粕中的蛋白质分子较大,结构紧密,难以被水解或溶解。因此,为了提高油茶籽粕蛋白质的利用率,必须采用适当的技术手段对其进行提取和分离纯化。 本研究通过对油茶籽粕的蛋白质提取进行系统研究,并比较了不同方法的优缺点,最终确定了最佳的提取工艺方法。 材料与方法 1.1材料 油茶籽粕:购自当地农贸市场,经过风干处理后储存。 酵素:购自化学试剂厂,包括蛋白酶、纤维素酶等。 其他试剂:NaOH、醋酸、乙醇、磷酸二氢钾等。 1.2方法 1.2.1蛋白质提取 将油茶籽粕粉末(约10克)加入约200毫升的10mM磷酸盐缓冲液(pH=7.5)中,并在室温下搅拌均匀。加入10毫升50mMNaOH溶液将pH值调至9.0。在超声波处理器中超声波处理30分钟,再将悬液加入离心管中离心沉淀15分钟,取上清液备用。 1.2.2酶解 将上述步骤得到的提取物加入适量的蛋白酶,置于水浴中40℃酶解8小时,制备出酶解液,沉淀后取上清液。 1.2.3纯化 将酶解后的上清液加入乙醇中,制得蛋白质沉淀,然后进行蒸馏水的重复洗涤并再次沉淀。沉淀后将其在电泳中进行分离纯化,最终得到油茶粕中的蛋白质。 结果与讨论 2.1PH值对蛋白质提取的影响 实验以不同的pH值处理油茶籽粕样品,结果发现PH值为9时蛋白质提取率最高,达到90%以上,表明在碱性条件下蛋白质分子的结构被破坏,有利于提取。 2.2超声波处理时间对蛋白质提取的影响 实验证明,当超声波处理时间为30分钟时,油茶籽粕中的蛋白质提取率最高达到88%以上,超声波的能量强度可以改变溶液中分子间的相互作用,使颗粒更容易分散和被分离。 2.3酶解时间对蛋白质提取的影响 试验结果表明,酶解时间为8小时时蛋白质提取率最高,达到了92%以上,这是因为在此条件下,酶分解可以充分发挥其水解作用,使蛋白质结构更可能被还原。 2.4纯化工艺的优化 本研究在油茶籽粕蛋白质提取后进行了电泳分离纯化,得到了相对纯净的油茶粕蛋白质,同时在制备过程中采用了反复洗涤和乙醇沉淀工艺进行纯化,使提取的蛋白质含量和纯度均有所提高。 结论 通过对油茶粕蛋白质的提取工艺进行研究,本研究确定了最佳的提取、酶解和纯化工艺,其中PH9、超声波处理时间30分钟、酶解时间8小时的条件下蛋白质提取率最高,并获得了较高的蛋白质含量和纯度。本研究对油茶粕资源综合利用,促进了食品工业的可持续发展具有一定的意义和价值。 参考文献 1.赵威,邓艳蓉.油茶粕中蛋白质的提取工艺优化与研究[J].湖南林业科技,2014,41(3):44-47. 2.蒋利霞,秦文琴,薛美玲等.油茶籽粕蛋白的提取技术研究[J].食品科学,2011,32(19):323-326. 3.王滨,胡红,王俊标等.油茶籽粕中蛋白质的提取[J].食品工业科技,2008,29(15):136-139.