基因工程的基本操作步骤PPT课件.ppt

基因工程的基本操作程序1、基因工程包括哪些步骤？3基因工程的基本操作程序主要是指编码蛋白质的基因（二）获取目的基因的方法1、从基因文库中直接获取（2）基因文库的建立方法某种生物的单链mRNAPCR技术—多聚酶链式反应利用PCR技术扩增目的基因5’蛋白质的氨基酸序列——核心基因表达载体的构建编码区编码区基因表达载体的组成：1、下列属于获取目的基因的方法的是
①利用mRNA反转录形成
②从基因组文库中提取
③从受体细胞中提取
④利用PCR技术
⑤利用DNA转录
⑥人工合成
A.①②③⑤B.①②⑤⑥
C.①②③④D.①②④⑥2、1997年，科学家将动物体内的能够合成胰岛素的基因与大肠杆菌的DNA分子重组，并且在大肠杆菌中表达成功。请据右下图回答问题。
(1)此图表示的是采取__________合成基因的方法获取__________基因的过程。
(2)图中①DNA是以为__________________模板，形成单链DNA，在酶的作用下合成双链DNA，从而获得了所需要的目的基因。(3)图中③代表，
它往往含基因，以便对
目的基因的检测。将目的基因导入植物细胞的方法土壤农杆菌转化法示意图将目的基因导入动物细胞的方法将目的基因导入微生物细胞方法四、目的基因的检测与鉴定不能，受体细胞必须表现出特定的性状，才能说明目的基因完成了表达。多细胞生物的检测，将每个受体细胞单独培养并诱导发育成完整个体，检测这些个体是否摄入目的基因，摄入的基因是否表达（是否表现出相应的性状）。淘汰无变化的个体，保留有相应变化的个体进一步培养、研究。3．（2010江苏高考，27题，8分）下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图l、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：
（2）若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越。
（3）用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是。
（4）与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止。
（5）为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入酶。
（6）重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了。
（7）为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在
的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。