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1.2基因工程的基本操作程序 教学过程 教学内容教学手段 和方法预期 目标1.课前预习,引入对基因工程的基本操作程序的学习。 2.学习目的基因的获取 2.1从基因文库中获取目的基因 2.2利用PCR技术扩增目的基因 3.学习基因表达载体的构建 4.将目的基因导入受体细胞 4.1将目的基因导入植物细胞 4.2将目的基因导入动物细胞 4.3将目的基因导入微生物细胞 5.学习目的基因的检测与鉴定 6.布置作业 课前准备:通过预习解决以下问题 基因工程的基本操作程序主要包括哪几个步骤? 试分析每一步骤的必要性。 师:通过预习同学们都能解决第一个问题,基因工程的基本操作程序包括…… 生:目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 师:第二个问题我们可以将它拆分成四个小问题逐个儿解决: 为什么要有“目的基因的获取”这一步? 先请一个同学将基因工程的原理告诉大家。 生:基因工程是指按照人们的愿望,进行严格的设计,通过体外DNA重组和转基因等技术,赋予生物以新的遗传特性,创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 师:这既是基因工程的原理又是其概念,通过这一表述中的“创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品”你得出什么样的信息? 生:这是基因工程的优点也是基因工程的目的,可以实现这一目标的只有目的基因,有了目的基因我们才能赋予一种生物以另一种生物的遗传特性。 师:很好,良好的开端等于成功的一半,我们继续往下分析 为什么要有“表达载体的构建”这一步? 生:构建表达载体的目的是为了使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能表达和发挥作用。(教材P11) 师:看来同学们课前已经进行了精心预习了,那么第三步“目的基因导入受体细胞”它又是出于什么目的呢? 生:单独的DNA片段──目的基因是不能稳定遗传的,含有目的基因的表达载体只有进入受体细胞,并且维持稳定和表达,才能实现一种生物的基因在另一种生物中的转化。(教材P12) 师:最后一步“目的基因的检测与鉴定”呢? 生:这是因为目的基因是否真正插入受体细胞的DNA中,是否能够在受体细胞中稳定遗传和正确表达,只有通过检测、鉴定才能得知。(教材P13) 师:看来基因工程的每个操作步骤都是必不可少的,下面我们按照基因工程的操作步骤,对每一程序的相关技术和方法进行学习 一、目的基因的获取 通俗地讲就是将需要的基因从供体生物的细胞内提取出来。阅读教材9~11页相关内容,回答下列问题: 什么是目的基因,举例说明。 生:目的基因主要是指编码蛋白质的结构基因,例如,与生物抗逆性有关的基因、与优良品质相关的基因、与生物药物和保健品有关的基因、与毒物降解有关的基因,以及与工业所需用酶相关的基因等。 师:同样目的基因还可以是一些具有调控作用的因子。目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 师:获得目的基因的方法有哪些? 生:可以从基因文库中获取目的基因,还可以利用PCR技术扩增目的基因。 师:什么是基因文库? 生:将含有某种生物不同基因的许多DNA片段,导入受体菌的群体中储存,各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因,称为基因文库。 师:什么是部分基因文库? 生:只含有一种生物的一部分基因,这样的基因文库叫做部分基因文库。 师:基因文库包含了某种生物的全部基因,又可称为基因组文库,如果将每个基因看成一本书则基因文库就可以比喻成国家图书馆,这里的资料既多又齐全,而部分基因文库只包含了该生物的部分基因,如,cDNA文库,因此部分基因文库只能比喻成某个市或单位的图书馆。阅读教材P11的生物技术资料卡,比较cDNA文库和基因组文库的区别。 师:怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因? 生:根据基因的核苷酸序列、基因的功能、基因在染色体上的位置、基因的转录产物mRNA,以及基因翻译产物蛋白质等特性来获取目的基因。 师:很好。除了这种方法我们还可以利用PCR技术扩增目的基因。PCR是聚合酶链式反应(polymerasechainreaction)的缩写,是一项再生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术,可获取大量的目的基因。通过阅读教材完成下列填空。 原理:(DNA的复制) 条件:(已知基因的核苷酸序列,四种脱氧核苷酸,一对引物,DNA聚合酶) 方式:以(指数)方式扩增,即(2n)(n为扩增循环的次数