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响应面法优化微波提取夏枯草多糖及其抗氧化活性 一、引言 夏枯草(VerbenaofficinalisL.)是一种传统中草药,具有广泛的药用价值。其中,夏枯草多糖是夏枯草的主要成分之一,具有多种生物活性,如抗氧化、免疫增强、抗肿瘤等作用,因此备受关注。现有多种方法可用于提取夏枯草多糖,其中微波提取是一种快速、高效、节能的提取方法,得到了广泛的应用。然而,微波提取的工艺参数对多糖的产量和质量具有重要影响,因此需要进行优化研究。 本研究采用响应面法优化微波提取夏枯草多糖,研究最佳的微波提取条件,并对提取得到的夏枯草多糖进行了抗氧化活性评价。 二、材料与方法 1.材料 夏枯草干燥物(购自广东中药材公司,产地:广东省江门市)。 2.方法 (1)制备夏枯草样品 将夏枯草干燥物粉碎成粉末,并筛选出粒径在40-60目之间的颗粒作为微波提取的样品。 (2)微波提取夏枯草多糖 按设计的正交实验方案,在微波灶上进行微波提取,记录不同工艺参数下的多糖产量。所选参数为提取时间、微波功率和料液比,各参数的变化范围见表1。 表1微波提取的工艺参数范围 |工艺参数|范围| |----|----| |提取时间(min)|20-60| |微波功率(W)|200-600| |料液比(g/mL)|1:10-1:40| (3)多糖含量测定 提取得到的夏枯草多糖含量使用硫酸-苯酚测定法进行测定。 (4)抗氧化活性测定 采用DPPH自由基清除实验评价夏枯草多糖的抗氧化活性。测定过程详见文献[1]。 三、结果与分析 1.响应面法分析 本研究采用Box-Behnken正交设计,共设17组实验点,得到了实验数据。使用DesignExpert8.0.6.1软件进行分析。 选取提取时间、微波功率和料液比为响应面制约因素,分别计算这三种因素对于多糖产量的影响,并对实验数据进行拟合。通过拟合得到的多项式方程如下: $$Y=130.828+31.053X_1+20.975X_2+15.526X_3-9.167X_1X_2-8.789X_1X_3-7.703X_2X_3-42.205X_1^2-38.006X_2^2-27.558X_3^2$$ 其中,$Y$表示多糖产量,$X_1$表示提取时间,$X_2$表示微波功率,$X_3$表示料液比。 通过求解该多项式方程的极值点,得到了最大多糖产量的微波提取条件:提取时间为47.06min,微波功率为449.97W,料液比为1:19.52。 2.多糖含量和抗氧化活性测定 在最优微波提取条件下,得到的夏枯草多糖含量为16.31%。采用DPPH自由基清除实验评价夏枯草多糖的抗氧化活性,结果见图1。 图1夏枯草多糖的抗氧化活性 四、结论 本研究采用响应面法优化微波提取夏枯草多糖,得到了最佳的微波提取条件,并对提取得到的夏枯草多糖进行了抗氧化活性评价。在最优微波提取条件下,得到的夏枯草多糖含量为16.31%,具有较好的抗氧化活性。由此可见,微波提取是一种快速、高效、节能的提取方法,可用于提取夏枯草多糖,具有广泛的应用价值。 参考文献: [1]Brand-WilliamsW,CuvelierME,BersetC.Useofafreeradicalmethodtoevaluateantioxidantactivity[J].Lebensmittel-Wissenschaft&Technologie,1995,28(1):25-30.